2022 Fiscal Year Research-status Report
血管再生療法を可能にする臨床応用可能な大量培養液からのエクソソーム単離法の開発
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22K08959
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石井 治之 山口大学, 大学院創成科学研究科, 准教授(テニュアトラック) (80565820)
溝口 高弘 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (90844796)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 細胞外小胞 / 血管新生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、293T細胞の浮遊培養の検討、培地の適応性の確認を行った。
シェーカーフラスコに、293T細胞を、様々な細胞密度で播種して浮遊培養を行った。同時に、同じ細胞密度で293T細胞をdishに播種して静置培養を行った。浮遊培養および静置培養では、それらに適応した完全合成培地を使用した。培養後に、細胞数をカウントすることで、培養期間と培養により増えた細胞数を計算した。
次に、シェーカーフラスコに入れる培養液量も検討した。同じ細胞密度で、培養液量を検討することで、細胞増殖能を検討した。
上記の実験時には、培養後の培養液を回収し、培養液中のエクソソームの濃度測定、培養液からのエクソソーム単離のためにqEVカラムを使用することで検討した。qEVカラムを使用して純度の高いエクソソームを単離できる分画を検討した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
効率的にエクソソームを得るには、静置培養よりも浮遊培養で培養した細胞が分泌するエクソソームを単離する方法を確立することであるが、本年度は、その方法の基盤となる結果を得ることが出来た。
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| Strategy for Future Research Activity |
293T細胞を浮遊培養で大量に培養し、その培養液からエクソソームの分画を効率的に得る方法を検討する。
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[Journal Article] Cryopreserved allogenic fibroblast sheets: development of a promising treatment for refractory skin ulcers2022
Author(s)
Ike S, Ueno K, Yanagihara M, Mizoguchi T, Harada T, Suehiro K, Kurazumi H, Suzuki R, Kondo T, Murata T, Shirasawa B, Morikage N, Hamano K.
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Journal Title
American Journal of Translational Research
Volume: 14
Pages: 3879-3892
Peer Reviewed / Open Access
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