2023 Fiscal Year Research-status Report
急性呼吸促迫症候群に対する造血幹細胞移植：炎症制御と血管再生の試み
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22K09131
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| Research Institution | Aichi Medical University |
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Principal Investigator |
加納 秀記 愛知医科大学, 医学部, 教授 (90340231)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武山 直志 愛知医科大学, 愛知医科大学, 名誉教授 (00155053)
梶田 裕加 愛知医科大学, 医学部, 講師 (00351099)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | ARDS |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ARDS発症機序として、neutrophil extracellular traps構成成分であるDNAに結合したprotease、histone、血小板血栓などによる細胞障害が一因として考えられている。ARDSに対する治療戦略として、これら攻撃因子を抑制する炎症制御が、主に検討されている。異なるる治療戦略として、防御因子を高める再生・修復促進に関しては、これまでの所、全く検討が行われていない。骨髄由来の幹細胞は、組織低酸素、組織障害時に骨髄から障害組織に急速にホーミングされ集積する。障害部位にホーミングした幹細胞は、抗アポトーシス、抗酸化ストレス、抗炎症作用を発揮し、障害細胞の再生・修復機能を担う。本研究は、骨髄からの前駆細胞の動員、前駆細胞動員に関与する液性因子濃度と肺酸素化との関連をヒトのARDSで検討する。
対象は、敗血症性ARDSの成人で、診断後1、3、5、7、14日目に各々4mlずつ採血し、末梢血中幹細胞数、VEGF、GM-CSF、CXCL12、soluble Tie2受容体, angiopoietin 1-2, VEGF受容体1-2、PDGF、血中遊離トロンボモジュリン、syndecan-1、好中球CD64発現量、MPO-DNA, NE-DNA, 内皮細胞由来microparticleを測定する。BALFにおいては好中球数、NE-DNA, MPO-DNA, 好中球CD64発現を測定する。
現在、NETs産生量の指標として血液中のMPO-DNA, NE-DNA, cell-free DNAの測定を開始している。cell-free DNAは、Qubit３蛍光光度計を用いて順次測定を行っている。MPO-DNA, NE-DNAは、96穴マイクロプレートに、抗MPOおよび抗NEモノクローナル抗体を固着させたのちマイクロプレートリーダーで測定するサンドイッチELISA法を用いている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
neutrophil extracellular trapsの指標として有望な血液中のcf-DNA, NE-DNA, MPO-DNA定量を中心に検討を進めている。新たにCOVID-19患者の検体も加えて解析を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
血液中NE-DNA, MPO-DNAの定量方法が確立できたので、ARDS時におけるNETs動態を明らかにする予定である。ウイルス感染によるCOVID-19患者のARDS発症と非ウイルス感染によるARDS発症の違いも検討を加える予定である。
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| Causes of Carryover |
予定していた試薬購入が年度内に間に合わなかったため、試薬購入費の必要額が少なかった。
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