脂肪由来間質細胞による脊髄損傷治療 -髄腔内投与後の組織分布と運動機能解析-

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K09351
• Research Institution: University of Fukui
• Principal Investigator: 高橋 藍 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 講師 (90615303)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中嶋 秀明 福井大学, 学術研究院医学系部門, 准教授 (10397276) ; 渡邉 修司 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 助教 (00596679)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 脊髄損傷 / 脂肪由来間葉系間質細胞 / 髄腔内投与 / 経静投与 / 生体イメージング

Outline of Annual Research Achievements

本研究では，脊髄損傷モデルに対して脂肪由来間葉系間質細胞（AD-MSCs）を髄腔内投与後，細胞分布動態の観察および脊髄再生・運動機能の解析を行っている。急性脊髄損傷（胸髄損傷）モデルに対し，腰椎部より髄腔内投与されたAD-MSCsは移植後経時的に脊柱管内に分布していることが，生体イメージング装置（IVIS）で観察された。比較として，経静脈投与されたAD-MSCsはすみやかに肺に集積し1時間以内に発光は消失した。実験結果は令和5年，6年度の国内学会で発表した（第38回日本整形外科学会基礎学術集会，第53回日本脊椎脊髄病学会学術集会）。尚，今回の実験の基盤となった，脂肪由来間葉系間質細胞移植
による重度脊髄損傷治療効果については，英語論文で発表した（Adipose-Derived Mesenchymal Stromal Cell Transplantation for Severe Spinal Cord Injury: Functional Improvement Supported by Angiogenesis and Neuroprotection. Cells. 2023）。

①ヌードマウス（KSN/Slc）を用いて，IHインパクターにて中等度脊髄損傷モデルを作成した②同マウスより脂肪組織を採取し，AD-MSCsの分離・培養を行った③フローサイトメトリー法によりAD-MSCsの表面抗原解析を行った④AD-MSCにDiR750でラベリングを行い，髄腔内投与し，生体イメージング（IVIS Imaging System）での分布観察を行った⑤ルシフェラーゼ発現マウス（FVB-Tg(CAG-luc,-GFP)L2G85ChcoJ）よりAD-MSCsを分離・培養し脊髄損傷モデルに対しビ静脈投与を行い，分布をIVIS Imaging Systemで観察した

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

IVIS Imaging Systemでの観察が可能となったことから，移植後ごく短時間の細胞動態が観察できるようになった。そのため，当初の髄腔内投与に加え，経静脈投与後の細胞分布の観察も加えて行っているため。

Strategy for Future Research Activity

投与細胞数の運動機能に対する効果解析，および神経再生についての組織学的評価を行う予定である。