血小板とリンパ管内皮細胞の相互作用を標的にした新たなリンパ浮腫治療の開発

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K09854
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 植木 春香 新潟大学, 医歯学総合病院, 医員 (10899933)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田中 宏明 新潟大学, 医歯学総合病院, 医員 (80965260) ; 平島 正則 新潟大学, 医歯学系, 教授 (40383757) ; 松田 健 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50423166) ; 椎谷 友博 新潟大学, 医歯学系, 助教 (80613190)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: リンパ浮腫 / マウス / リンパ管静脈吻合 / 臨床モデル

Outline of Annual Research Achievements

実験1：後肢リンパ浮腫モデルマウス作成
先行報告(Iwasaki et al, Plast Reconstr Surg. 2017)を一部改変した方法を用いてマウス後肢リンパ浮腫モデルを作製した。三種混合麻酔薬を腹腔内投与し、後肢基部を剃毛、FITC標識デキストランを後肢足底部に局所注射してリンパ浮腫、主幹リンパ管を描出した。後肢基部を全周切開し筋膜上で剥離操作を行った。描出されたリンパ節を含めた軟部組織を切除、主幹リンパ管を結紮した。皮膚欠損部にシリコンシートを留置し、皮下組織同士が接触しない状態で剥離した皮膚および皮下組織を筋膜上に固定した。術後定期的に後肢腓腹筋腱移行部での周径測定を行い、術後7日頃をピークとする安定した浮腫が形成されることを確認した。
実験2：各種薬剤の投与
上記の後肢リンパ浮腫モデルマウスに対して皮下組織の挫滅操作および各種薬剤の投与を行った。脂肪吸引手技はマウスの皮下で行うことは困難であり、マイクロフックでの皮下組織の挫滅操作のみに変更した。また、後肢容積の測定は測定誤差が大きく、腓腹筋腱移行部での周径測定に変更した。実施計画に記した薬剤のうち、抗podoplanin抗体、PLC阻害剤の投与を行い、現在経過観察を行なっている最中である。
実験3：組織形態学的評価
切開創より遠位で後肢断面の組織形態学的評価を行うための固定、観察法について検討を行なっている。また、血管・リンパ管の可視化のため、組織透明化による観察法についても検討中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

幾つか検討を要した点はあったものの、リンパ浮腫モデルの作成は問題なく可能であった。また、薬剤の調達、調製などについても特に問題なく進行している。

Strategy for Future Research Activity

更なる薬剤投与を進め、リンパ浮腫の治療に繋がりうる薬剤の検索を進める。組織形態学的評価の方法についても確立させる。また、治療薬の候補が発見できなかった場合は血小板ーリンパ管内皮の相互作用に着目して他の薬剤を検討する。

Causes of Carryover

リンパ浮腫モデルマウスの作成に想定より期間を要したため、想定よりも薬剤投与量が少なかったために薬剤購入費用が低く抑えられた。また、学会参加がリモートで可能であったため、渡航費が抑えられた。
薬剤購入費用はその分今年必要となる予定である。