Mechanism of growth inhibition by cesium on keloid-derived fibroblast

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K09886
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 小山 明彦 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (70374486)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 大輔 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (40528080) ; 永峰 恵介 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (70937820)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2027-03-31
• Keywords: ケロイド / ケロイド由来線維芽細胞 / 塩化セシウム処理

Outline of Annual Research Achievements

ケロイドでは線維芽細胞の過剰な分裂増殖しその活動性が亢進することで膠原線維が過剰に産生されていることが知られている。本研究では提供されたケロイド の検体から線維芽細胞を分離培養し、細胞増殖抑制効果があることが見出されている塩化セシウムを添加することで線維芽細胞の増殖や膠原線維線維などの代謝 産物への影響を明らかにする。 現在、ケロイド組織から単離培養されたケロイド由来線維芽細胞(KF)に塩化セシウム処理(CsCl処理)をすることでKFの増殖への影響、細胞骨格、ストレスファイバーや細胞外マトリックス（ECM）のタンパク質の産生や機能への影響について研究を行っている。
CsCl処理を行うことでKFの増殖率は低下し、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型コラーゲンの産生は遺伝子転写レベルで抑制される傾向にあることがわかってきた。今後より詳細な解析を行い研究発表を行う予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究は提供されたケロイド検体から初代培養で線維芽細胞（KF）を得て、3-5継代後に各種研究を行う。得られたKFにCsCl処理を行い細胞増殖抑制効果や蛍光顕微鏡による各種タンパク質の機能への影響の評価、Western blottingによるタンパク質産生量への評価、qPCRによるそれぞれのタンパク質の遺伝子転写量への評価を行なっている。CsCl処理を行うことで細胞増殖の抑制効果が確認された。免疫染色において、細胞骨格やα-SMA、コラーゲンタンパク質への影響も確認されている。さらにタンパク質の産生については転写レベルで抑制されている可能性があり、現在この解析を行っている。
これらのことから概ね順調であると判断している。

Strategy for Future Research Activity

本研究では、現在行なっているCsCl処理によりタンパク質量や遺伝子への影響について解析に加え、KFへの代謝活性の評価を行っていく予定である。 代謝活性への影響については解糖系の代謝産物である乳酸、NAD+、NADHの定量等を行なう予定である。

Causes of Carryover

本年度分として残額5,833のためほぼ使用予定額いっぱいを使用させて頂いた。
今後も抗体や試薬、検査キット等の購入を予定している。