2023 Fiscal Year Research-status Report
13C標識アミノ酸法によるたんぱく質耐容上限量の推定に関する基礎研究
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22K11817
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| Research Institution | Konan Women's University |
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Principal Investigator |
小川 亜紀 甲南女子大学, 医療栄養学部, 助教 (80612308)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木戸 康博 金沢学院大学, 栄養学部, 特任教授 (50195319)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | たんぱく質耐容上限量 / 13C標識アミノ酸法 / ラット / 日本人の食事摂取基準 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
13C標識アミノ酸法は、13Cで標識したアミノ酸を経口摂取し、呼気に排出される13CO2量から体内のアミノ酸代謝を測る方法である。本研究では、13C標識アミノ酸法の一つである直接アミノ酸酸化（direct amino acid oxidation; DAAO）法を用いてたんぱく質耐容上限量を推定する。
ラットを、12時間明暗サイクル（明期 20:00～08:00）、20％カゼイン食を自由摂食として飼育した。DAAO法の実験食として40、50、60、70%カゼイン食を用い、標識アミノ酸L-[1-13C]フェニルアラニンは、各実験食のカゼインに含まれるフェニルアラニンの10%量を混餌した。DAAO法の実施日9:00～18:00、1時間毎に平均1日摂食量の1/12量の実験食を摂食させた。9:00～19:00、1時間毎に呼気中13CO2量を測定した。13Cを含む実験食摂取後の呼気中13CO2量は経時的に増加し、17:00以降は一定値となった。実験食のたんぱく質含量が高くなるにつれ呼気中13CO2量の増加量も高値となったが、60%～70％カゼイン食では差が見られなかった。タンパク質摂取量と19:00の呼気中13CO2量の相関を見ると60～70%カゼイン食の間に変曲点が見出され、変曲点となるたんぱく質摂取量をラットのたんぱく質耐容上限量と推定できると考えられた。ラットにおいてDAAO法はたんぱく質耐容上限量を算出する方法となり得ることが示唆された。
2023年度は、4週間、ラットに40%（n=6）、50%（n=6）、60%（n=6）、70%（n=6）カゼイン食を自由摂食させた後にDAAO法を実施するスケジュールとして実験を行った。たんぱく質摂取量を普通～高たんぱく質食に適応させた状態のラットにおいて、血中尿素窒素、尿中尿素窒素と呼気13CO2量の関係を考察する。結果は解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2022年度に行った実験の結果の考察が進んだ。それを踏まえて実験スケジュールを修正し、2023年度は新たな実験に取り組むことができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
2023年度に行った実験の結果を解析しながら、2024年度は主にラットのn数を増やすことを目的に同様の実験を進める。
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| Causes of Carryover |
2023年度に行った実験ではラットの使用数を抑えたため、次年度は主にn数を増やす目的で実験に取り組む。2023年度に採取したラット検体（血液・尿・腎周囲脂肪）の解析は、これから進めていくため、次年度使用額を充てる。
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