2023 Fiscal Year Research-status Report
狂犬病ウイルス感染初期の所属リンパ節における宿主応答の解析
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22K14994
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| Research Institution | Oita University |
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Principal Investigator |
君付 和範 大分大学, 医学部, 講師 (10829724)
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2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 狂犬病 / 末梢感染 / マウスモデル / リンパ節 / 宿主免疫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度に引き続き、狂犬病ウイルス1088株の強毒株（wt）あるいは弱毒株（N30）を接種したBALB/cマウスの所属リンパ節におけるトランスクリプトーム解析を実施した。接種1日目から5日目におけるCxcl10、Irf1、Cxcl11、Irf9、Cxcl9、及び Stat1の発現をリアルタイムPCRを用いて比較定量したところ、N30感染マウスは接種1日目においてwt感染マウスよりもこれらの遺伝子が有意に高発現していることが明らかとなった。免疫関連遺伝子群(420遺伝子群)に焦点を置いたGene Set Enrichment Analysisでは、N30感染マウスでは接種3、5日目共にインターフェロンシグナルやMHCクラスIによる抗原提示に関連した遺伝子群が発現上昇していたが、wt感染マウスでは、これらの遺伝子群の発現は接種3日目でのみ発現上昇していた。さらに、N0感染マウスではMHCクラスIIによる抗原提示に関連した遺伝子群は接種5日目のみ、胚中心B細胞の分化に関連した遺伝子群は接種3、5日でも発現上昇はみられなかった。以上のことから、N30感染マウスにおける抗体産生をはじめとした免疫反応の増加は、感染1日目に自然免疫に関連した遺伝子の上昇および免疫関連遺伝子群の発現上昇維持が関与していたと示唆された。
一方、所属リンパ節における狂犬病ウイルスの局在部位を特定するため、組織透明化によるウイルス感染細胞の特定を試みたが、接種3、5日目では狂犬病ウイルス抗原を観察することができなかった。同時期のマウスの脳ではウイルス抗原を検出することができたことから、所属リンパ節におけるウイルス抗原量自体が微量であったため、検出できなかったと推察された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
申請書の計画に沿って実験を進められているため、おおむね順調に進展しているとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
狂犬病ウイルス1088株をマウスの右後肢足蹠に接種し、感染3日目の所属リンパ節を採取して細胞レベルでのウイルスの局在を明らかにする。細胞が同定されたら、正常マウスのリンパ節から標的となる細胞を分離あるいは株化細胞を用いて、in vitroでウイルス感染動態と遺伝子発現解析を行う。
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