Targeting liver fibrosis with CAR-T cells

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22K15982
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 付 慶傑 北海道大学, 医学研究院, 博士研究員 (20905509)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: CAR T細胞療法

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、CAR-T細胞による活性化した肝星細胞の特異的な除去後、肝線維症が改善されるかどうかを検討することを目的としている。しかし、マウスの活細胞染色では明確なFAPの発現が観察されず、また、NASHモデルや四塩化炭素誘発のマウス肝線維症モデルでは、肝線維化領域でのFAP過剰発現が検出されていなかった。そのため、人間の肝線維症では肝星細胞がFAPを過剰発現することが広く報告されているにもかかわらず、マウスの肝線維症モデルではFAP CAR-T療法の実験に適していない事が明らかになった。
肝星細胞の他、膵臓にも星細胞（PSC）が存在し、膵癌発症時には癌関連成線維芽細胞（CAF）として活性化される。膵臓星細胞も活性化後にFAPを発現すると報告されているため、我々は膵臓星細胞を標的としたCAR-T細胞療法の膵癌治療における可能性について検討した。
まず、我々はマウスPSCを分離し、活性化されたPSCのFAPの過剰発現を確認した。次に、FAP CAR-T細胞とPSCを共培養し、未処理（Blank）のT細胞やMOCK T細胞と比較すると、FAP CAR-T細胞が特異的にPSCを死滅させることを確認した。また、膵癌腫瘍微小環境（TME）をシミュレートするために、マウス膵癌細胞（KPCY）と活性化したPSCを用い、3D共培養を行った。PSCが腫瘍細胞の増殖を促進することを確認し、3D共培養システムにFAP CAR-T細胞を追加すると、腫瘍細胞の増殖が抑制され、その上、CAR-T療法とGemcitabineを併用することで、腫瘍細胞の増殖がさらに抑制されることが明らかになった。
我々はin vitroの実験において、CAFに対するCAR-T細胞の特異的な除去が膵癌細胞の増殖を抑制することを確認した。今後は動物実験を実施し、CAR-T細胞のin vivoでの抗腫瘍効果を検討する。