2022 Fiscal Year Research-status Report
肝細胞癌における、腫瘍細胞由来腫瘍血管内皮細胞誘導因子の解析
| Project/Area Number |
22K16530
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
松本 謙一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (60781721)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| Keywords | 肝細胞癌 / 腫瘍血管 / エクソソーム / mRNA / 形質転換 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
腫瘍血管内皮細胞(Tumor endothelial cell: TEC)は，癌細胞の血行性転移や増殖に重要な役割を担っていると報告されている．TECは正常血管内皮細胞(Normal endothelial cell: NEC)が，外的因子の影響により，TECへと変化すると考えられているが，そのメカニズムについては依然として不明である．肝細胞癌において腫瘍細胞由来腫瘍血管誘導因子が正常血管内皮細胞から腫瘍血管内皮細胞へ形質転化を惹起するという仮説に基づき，腫瘍血管内皮細胞誘導因子の同定，さらには新規血管新生阻害薬の開発を目指す．
2022年度時点の研究結果は次のとおり：マウス癌細胞株BNLをNECあるいはTECと混合投与し，形成された皮下腫瘍の血管密度の経時的変化を検討した．皮下接種後7日目における皮下腫瘍の血管密度は，TEC群で29.2/1視野であり，NEC群で14.6/1視野であり，TEC群において血管密度は大幅に高値であった．しかし皮下接種後10日目においては，TEC群で32.4/1視野，NEC群で26.8/1視野であり，TEC群とNEC群との差が大幅に減少していた．次にin vitroにおいて，癌細胞のCondition Mediumの添加によるNECの増殖能および遊走能をProliferation assay，Wound healing assayにより検討した．Condition mediumの添加によりNECの増殖能および遊走能は，それぞれ1.4倍，2.2倍に増加した．以上の結果より，腫瘍細胞由来の腫瘍血管誘導因子によりNECからTECへの形質転化の可能性が示唆された．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は腫瘍細胞培養上清による正常血管内皮細胞への影響を検討した．研究結果から，腫瘍細胞由来の腫瘍血管誘導因子によりNECからTECへの形質転化の可能性が示唆された．
|
| Strategy for Future Research Activity |
腫瘍細胞由来腫瘍血管誘導因子がNECからTECへ形質転化を惹起している可能性が示唆された．今後はvitroにおいては腫瘍細胞培養上清中に含まれるエクソソームやmicroRNA等を検討していく予定である．vivoにおいては腫瘍細胞と正常血管内皮細胞の混合腫瘍から経時的に単離した血管内皮細胞の遺伝子発現解析を行う．次世代シークエンサーにて，正常血管内皮細胞, およびDay7, Day10における腫瘍中血管内皮細胞への経時的な遺伝子発現解析を行い，発現変化を認める遺伝子群の同定を行う．
|
| Causes of Carryover |
2022年度は既存の物品・試薬および当科内予算で発注したマウスを使用することにより交付金を想定以上に温存することができた．次年度にはMACS消耗品，マウス購入費，エクソソーム抽出用物品，次世代シークエンサー費用が必要となるため，これに使用していく。
|
