Anti-tumor effect of EZH2 inhibitor on bone and soft-tissue sarcomas

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K16766
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 伊村 慶紀 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (40772687)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 類上皮肉腫 / INI1 / EZH2阻害剤 / Tazemetostat / 滑膜肉腫 / 淡明細胞肉腫

Outline of Annual Research Achievements

これまでSMARCB1/INI1遺伝子欠失進行性類上皮肉腫症例に対するEZH2阻害剤Tazemetostatの有効性が示されているが、その具体的な抗腫瘍効果の機序やその他の肉腫に対する効果はまだ不明な点が多い。類上皮肉腫はINI1遺伝子の欠失が特徴的とされるが、INI欠失とEZH2阻害剤による抗腫瘍効果の関連を調べるために、まず我々はヒト類上皮肉腫細胞株VAESBJにINI1遺伝子を強制発現させ、安定発現株を作製した。そのコントロールとしてGFP発現株も同時に作製した。INI1発現株ではGFP発現株に比してin vitroでの細胞増殖能やSphere形成能、in vivoでの造腫瘍能が低下した。INI1発現株ではGFP発現株よりEZH2のみならずc-Myc, AURKA, Plk1, E2Fのタンパク発現が低下し、p21, p27の発現が上昇した。現在、ヒト類上皮肉腫細胞株Asra-EPS, VAESBJの2株の他、INI1発現VAESBJとGFP発現VAESBJ、正常ヒト線維芽細胞株NHDFにおけるEZH2阻害剤による細胞増殖抑制効果を検討中である。また、滑膜肉腫や淡明細胞肉腫にはそれぞれ疾患特異的な融合遺伝子SS18-SSX, EWS-ATF1が存在するが、融合遺伝子発現とEZH2阻害剤による抗腫瘍効果の関連を調べるためにそれら融合遺伝子に対するsiRNAを設計し、ヒト滑膜肉腫細胞株、淡明細胞肉腫細胞株において各々の融合遺伝子の発現が減弱し、細胞増殖能が低下することを確認した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ヒト類上皮肉腫細胞株VAESBJにINI1遺伝子を強制発現させたINI1発現VAESBJとGFPを発現させたGFP発現VAESBJを作製したが、それらの遺伝子を安定的に発現した株の作製に時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

類上皮肉腫のみならず他の骨軟部肉腫細胞株を含めて、EZH2とその関連遺伝子、タンパク発現を調べる。ヒト類上皮肉腫細胞株と正常ヒト線維芽細胞株のEZH2阻害剤に対する感受性の違いやINI発現株とGFP発現株のEZH2阻害剤に対する感受性の違いを今後検討する予定である。また、滑膜肉腫や淡明細胞肉腫など他のヒト骨軟部肉腫細胞株へのEZH2阻害剤の抗腫瘍効果を評価し、その融合遺伝子の発現による変化も検証する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Establishment of Organoids From Human Epithelioid Sarcoma With the Air-Liquid Interface Organoid Cultures (2022)
  • Author(s): Wakamatsu Toru、Ogawa Hisataka、Yoshida Keiichi、Matsuoka Yukiko、Shizuma Kazuko、Imura Yoshinori、Tamiya Hironari、Nakai Sho、Yagi Toshinari、Nagata Shigenori、Yui Yoshihiro、Sasagawa Satoru、Takenaka Satoshi
  • Journal Title: Frontiers in Oncology Volume: 12 Pages: 893592
  • DOI: 10.3389/fonc.2022.893592
• [Journal Article] Comorbidity, body mass index, and performance status as prognostic factors in older patients with soft-tissue sarcoma (2022)
  • Author(s): Tamiya Hironari、Imura Yoshinori、Wakamatsu Toru、Takenaka Satoshi
  • Journal Title: Journal of Geriatric Oncology Volume: 13 Pages: 673～681
  • DOI: 10.1016/j.jgo.2022.02.011
• [Presentation] 転移性平滑筋肉腫における予後因子と治療成績 (2022)
  • Author(s): 伊村 慶紀, 竹中 聡, 王谷 英達, 中井 隆彰, 安田 直弘, 中井 翔, 若松 透, 田宮 大也, 角永 茂樹, 岡田 誠司
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] ビッグデータと骨・軟部腫瘍-全国骨軟部腫瘍登録- 全国骨腫瘍登録を用いた骨盤骨肉腫の予後因子の検討 手術の意義について (2022)
  • Author(s): 竹中 聡, 中井 翔, 若松 透, 田宮 大也, 中井 隆彰, 伊村 慶紀, 王谷 英達, 安田 直弘, 角永 茂樹
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 患者由来肉腫を用いた肉腫オルガノイド株およびマウス移植モデルの樹立 (2022)
  • Author(s): 若松 透, 小川 久貴, 吉田 恵一, 松岡 由紀子, 小巻 洋哉, 伊村 慶紀, 田宮 大也, 中井 翔, 屋木 敏也, 長田 盛典, 笹川 覚, 由井 理洋, 竹中 聡
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 胸壁発生の高悪性度軟部肉腫に対する治療成績 (2022)
  • Author(s): 中井 隆彰, 伊村 慶紀, 王谷 英達, 安田 直弘, 中井 翔, 若松 透, 田宮 大也, 竹中 聡, 角永 茂樹, 岡田 誠司
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 粘液型脂肪肉腫に対する術前補助化学療法の有効性 (2022)
  • Author(s): 中井 隆彰, 王谷 英達, 伊村 慶紀, 安田 直弘, 中井 翔, 若松 透, 田宮 大也, 竹中 聡, 角永 茂樹, 岡田 誠司
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 原発性骨悪性腫瘍の粒子線治療後局所再発に対する粒子線再照射の治療成績 (2022)
  • Author(s): 高見 晴奈, 王谷 英達, 伊村 慶紀, 中井 隆彰, 岡田 誠司, 竹中 聡, 田宮 大也, 若松 透, 中井 翔, 今井 礼子, 出水 祐介
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 原発性悪性骨腫瘍に対し粒子線治療後に局所外科治療を施行した9例 (2022)
  • Author(s): 王谷 英達, 伊村 慶紀, 中井 隆彰, 高見 晴奈, 竹中 聡, 田宮 大也, 若松 透, 中井 翔, 今井 礼子, 出水 祐介, 岡田 誠司
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
• [Presentation] 骨幹部転移性骨腫瘍に対する人工骨幹および髄内釘による再建法の臨床成績とその適応 (2022)
  • Author(s): 若松 透, 伊村 慶紀, 田宮 大也, 屋木 敏也, 安田 直弘, 中井 翔, 中井 隆彰, 王谷 英達, 濱田 健一郎, 角永 茂樹, 竹中 聡
  • Organizer: 第55回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会