miR-30/miR-210比を用いた潜在性子宮内膜症の診断に関する基礎研究

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K16862
• Research Institution: Oita University
• Principal Investigator: 青柳 陽子 大分大学, 医学部, 医員 (00883828)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 子宮内膜症 / バイオマーカー / miR-210 / miR-30

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、子宮内膜症におけるmiR-30とmiR-210の役割（標的分子の発現検証、機能解析）を明らかにし、miR-30/miR-210 ratioが早期診断のバイオマーカーとなりうるかを検証することである。
ヒト正常および子宮内膜症間質細胞を用いたmiR-30とmiR-210の発現解析を行った。正常子宮内膜間質細胞ではmiR-30a-5pが、卵巣子宮内膜症間質細胞ではmiR-210の発現が増強した。IPA（Ingenuity Pathway Analysis）を用いたパスウェイ解析を行い、miR-30とmiR-210の標的分子を抽出した。miR-132の標的分子として、Kruppel-like factor 9、paired-like homeodomain 1、tolloid-like 1、tolloid-like 2、period circadian clock 2、period circadian clock 3が抽出された。また、miR-210の標的分子として、protein tyrosine phosphatase, nonreceptor type 1、E2F transcription factor 3、growth hormone receptor、thymidine kinase 1が抽出された。PCR法を用いて、これらの標的分子の発現解析を行い、既存の報告と同様の結果となった。
標的分子について、ウエスタンブロッティング法を用いた蛋白発現の検証中である。また、子宮内膜症マウスを用いた標的分子の発現解析の準備を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

主任教授変更に伴う研究環境の再整備中であり、実施可能な実験手技ならびに試料で研究を継続した。

Strategy for Future Research Activity

正常および子宮内膜症間質細胞を用いた機能解析として、miR-30、miR-210、miR-30＋mR-210を強制発現させたヒト正常および子宮内膜症間質細胞を用いて、線維化、細胞増殖能、細胞死耐性を評価する。また、子宮内膜症マウスを用いた標的分子の発現解析の準備を進めている。

Causes of Carryover

購入済の試薬および物品を主に使用した。実験機器に関しても、既存の機器を使用し、新規の購入は行わなかった。
次年度は、発現解析や動物実験に関する試薬（抗体、プライマーなど）や実験物品の購入、論文校正費を主に予定している。