2023 Fiscal Year Research-status Report

免疫学的アプローチによる早産におけるアラーミンの機能解明

Research Project

Project/Area Number	22K16887
Research Institution	Nippon Medical School
Principal Investigator	加藤雅彦日本医科大学, 医学部, 助教 (90614751)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2026-03-31
Keywords	早産 / アラーミン / 羊水
Outline of Annual Research Achievements	早産は最も多く遭遇する産科合併症であり、児の予後を大きく左右する。一般に病原体感染に起因する絨毛膜羊膜炎（chorioamnionitis：CAM）は主要な早産の原因であるものの、CAMを伴わず原因不明に分類せざるを得ない症例も多く、その発症メカニズムには不明な点が多い。近年、心血管疾患、腎臓病、糖尿病などの領域において、強い炎症を惹起する“アラーミン”と呼ばれる分子群が注目されている。このアラーミンは生体の免疫系に作用、無菌性炎症を惹起し様々な病態を引き起こす。本研究では羊水中のアラーミンを解析するとともにそれによって惹起される免疫機構の検索を目的とする。本研究では帝王切開術中に採取された羊水を検体として取り扱うが、骨盤位や既往帝王切開の適応で予定帝王切開に至った症例（陣痛なし）、分娩進行中、分娩停止となり緊急帝王切開となった症例（陣痛あり）との比較を行う。さらに早産や妊娠高血圧腎症などの妊娠合併症症例の検索も行い、陣痛発来やさまざまな産科合併症に関わる、アラーミン、免疫細胞動態を解析する。現在サンプルとして、予定帝王切開術中で採取した陣痛を有さない症例、陣痛を有する症例、子宮内胎児発育不全、妊娠高血圧腎症、早産などさまざまな症例の羊水を採取している。さらに流早産モデルマウスを使用した動物実験も計画している。これらマウスの羊水を採取し、免疫細胞、アラーミン、サイトカインの解析を行い、流早産発症に寄与する因子の模索も行い、ヒト羊水との相同性を検討する。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 本研究期間において、研究者が所属する期間の倫理委員会承諾を得て羊水サンプルの検討が始められた。陣痛あり／なしの症例、子宮内胎児発育不全、妊娠高血圧腎症、早産症例などこれまでおよそ50症例が集められた。本年度はこれらに存在するアラーミン、サイトカイン、酸化ストレスなどの各解析を予定している。さらに流早産モデルマウスを使用した動物実験も開始しており、羊水中の免疫細胞およびアラーミン、サイトカイン、酸化ストレス解析も手技を確立し可能となった。今後ヒト羊水との相同性を検討していく。
Strategy for Future Research Activity	本研究期間において、研究者が所属する期間の倫理委員会承諾を得て羊水サンプル採取が行われ、これまでおよそ50症例が集められた。本年度はさらに症例数を増やすとともに、これらに存在するアラーミン、サイトカイン、酸化ストレスなどの各解析を行う。ELISA法、electrochemiluminescence法、酸化還元分析装置（REDOXLIBRA）を用いる予定である。さらに流早産モデルマウスを使用した動物実験も開始しており、妊娠マウス羊水中の免疫細胞およびアラーミン、サイトカイン、酸化ストレス解析行い、ヒト羊水との相同性を検討していく。
Causes of Carryover	研究遂行に際し、使用抗体量の適切な調整、器具の滅菌、再利用などで研究結果に影響のない範囲での節約を行なったため、次年度使用額が生じたためと考えられる。また本年度以降、次世代シーケンサーを使用したサイトカイン、アラーミンの解析を行う可能性もあり、相応の金額分を次年度へ持ち越した。