2022 Fiscal Year Research-status Report
Molecular mechanisms of pancreatic cancer progression induced by structural alternation of nucleic acids.
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22K19517
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
岸川 孝弘 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (00724171)
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| Project Period (FY) |
2022-06-30 – 2025-03-31
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| Keywords | 膵癌 / 二重鎖RNA / ノンコーディングRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、以下の３点について検討を行った。
①ヒト膵癌検体を用いて、Z型核酸を特異的に検出する抗体による免疫染色を行った。すでに結果の得られているマウス膵癌モデルの検証結果と同様に、ヒト膵癌組織でも正常組織と比較してZ型核酸の発現が亢進していることを示した。
②膵癌細胞株を用いて、Z型核酸を強制発現させることによる表現型の変化の観察を行った。まず人工Z型核酸を細胞内に導入する系の構築を試みたが、Z型核酸の細胞内での安定性について課題が残り、有意な表現型の変化を観察することができなかった。しかし、Z型核酸の産生を誘導する薬剤を投与することによって、膵癌細胞株においてネクロプトーシスシグナル経路が亢進することを示した。しかし細胞増殖には変化が認められず、癌細胞株にはネクロプトーシスを回避する機構が存在していることが示唆された。
③Z型核酸に特異的に結合するタンパク質ドメイン(Zaドメイン,Zbドメイン)を有するベクターの作成を行った。このベクターを細胞株に発現させることで、細胞中のZ型核酸をpull downさせるアッセイ系を構築するための条件検討を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体の評価を含めて、膵癌におけるZ型核酸発現の重要性についての知見を蓄積している。人工Z型核酸の細胞内での安定性について課題が残るが、修飾を加えた核酸での検討を準備しており、下流のシグナル系についての検証系は構築できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
人工Z型核酸を導入する系について来年度以降さらなる条件検討が必要である。
また膵癌細胞株由来の細胞外小胞を抽出し、Z型核酸の検出を試みる。
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| Causes of Carryover |
海外発注している人工合成核酸の材料搬入が数か月以上遅延しており、修飾核酸の納入が今年度内に行われなかった。それに伴う細胞実験が未施行となっている。引き続き発注は続けており、次年度早期に納入される予定である。
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