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2023 Fiscal Year Research-status Report

治療用細胞を作製する革新的バイオ界面の開発

Research Project

Project/Area Number 22K19899
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

長瀬 健一  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 准教授 (10439838)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 綾野 絵理  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 研究員 (10424102)
Project Period (FY) 2022-06-30 – 2025-03-31
Keywords温度応答性高分子 / 高分子ブラシ / 機能性界面 / バイオ界面 / 細胞分離 / 細胞組織 / 細胞治療
Outline of Annual Research Achievements

本研究は、治療用細胞を効率的に界面で作製するための温度制御型の機能性バイオ界面の作製を目的にしている。
2023年度は、標的細胞を界面上に効果的に捕捉するための二種類の機能性バイオ界面を作製した。
下層に細胞と特異的な親和性を有するペプチドを有する高分子、上層に温度変化により伸長・収縮を起こす温度応答性高分子を有するブロック共重合体をガラス基板に修飾した機能性界面を作製した。ガラス基板の表面に原子移動ラジカル重合(ATRP)の開始剤をシランカップリング反応により修飾した。さらに、クリック反応の官能基であるプロパルギル基を有する高分子を一段階目のATRPにより修飾し、二段階目のATRPで温度応答性高分子を修飾した。その後、クリック反応により細胞と特異的な親和性を有するペプチドを高分子界面に修飾した。作製した高分子修飾界面は、温度によって標的細胞を接着・脱離することで細胞を分離できる事がわかった。
また、下層に肝細胞と特異的な親和性を有する糖構造の官能基を有する高分子、上層に温度変化により伸長・収縮を起こす温度応答性高分子を有するブロック共重合体をガラス基板に修飾した機能性界面を作製した。作製した機能性界面に高温(37℃)で肝細胞を播種したところ、上層の温度応答性高分子が収縮することで、下層の糖構造の高分子と肝細胞が相互作用しやすくなるため、肝細胞の接着を促進させることができる事がわかった。さらに、肝細胞を機能性界面上で培養し、温度を下げることで、シート状の細胞組織を作製できることがわかった。
これらの結果より、標的細胞の高分子ブラシ界面への選択的接着と温度低下による標的細胞の回収、さらには細胞組織の作製が可能であることがわかった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当該年度に予定していた標的細胞のみを選択的に接着させる機能性高分子ブラシ界面の作製に成功している。また、標的細胞の純度を上げる条件検討をすることができた。さらには、細胞組織の作製にも成功している。これらの理由より当初の計画どおり順調に進捗しているといえる。

Strategy for Future Research Activity

2024年度は、2023年度に引き続き、界面上で細胞を操作する機能性高分子ブラシ界面の作製を行う。さらに、標的細胞の回収操作の最適化、標的細胞の機能性評価、機能性細胞組織の作製などを行う。

Causes of Carryover

依頼合成などを予定していた糖構造を有する高分子に関して、市販品の試薬で代用できることがわかった。このため、消耗品の使用を大幅に削減することができた。次年度以降への消耗品等に使用する予定である。

  • Research Products

    (53 results)

All 2024 2023 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (7 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 7 results,  Open Access: 6 results) Presentation (45 results) (of which Int'l Joint Research: 13 results,  Invited: 2 results)

  • [Int'l Joint Research] University of Utah(米国)

    • Country Name
      U.S.A.
    • Counterpart Institution
      University of Utah
  • [Journal Article] bFGF-releasing biodegradable nanoparticles for effectively engrafting transplanted hepatocyte sheet2024

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Marin Nagaoka, Yuto Nakano, Rie Utoh
    • Journal Title

      Journal of Controlled Release

      Volume: 366 Pages: 160-169

    • DOI

      10.1016/j.jconrel.2023.12.040

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Thermoresponsive block-copolymer brush-modified interfaces for effective fabrication of hepatocyte sheets2024

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Marin Nagaoka, Junnosuke Matsuda, Naoto Kojima
    • Journal Title

      Materials & Design

      Volume: 239 Pages: 112824

    • DOI

      10.1016/j.matdes.2024.112824

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Temperature-modulated separation of vascular cells using thermoresponsive-anionic block copolymer-modified glass2024

    • Author(s)
      Tadashi Hirotani, Kenichi Nagase
    • Journal Title

      Regenerative Therapy

      Volume: 27 Pages: 259-267

    • DOI

      10.1016/j.reth.2024.03.009

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Bioanalytical technologies using temperature-responsive polymers2024

    • Author(s)
      Kenichi Nagase
    • Journal Title

      Analytical Sciences

      Volume: - Pages: -

    • DOI

      10.1007/s44211-024-00545-3

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Ethylene glycol-based thermoresponsive block copolymer brushes with cell-affinity peptides for thermally controlled interaction with target cells2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Ruka Shimane
    • Journal Title

      Materials & Design

      Volume: 233 Pages: 112234

    • DOI

      10.1016/j.matdes.2023.112234

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Hydration and dehydration behaviors of poly(N-isopropylacrylamide)-grafted silica beads2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Junnosuke Matsuda, Ayako Takeuchi, Yuka Ikemoto
    • Journal Title

      Surfaces and Interfaces

      Volume: 40 Pages: 103058

    • DOI

      10.1016/j.surfin.2023.103058

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Umbilical cord?derived mesenchymal stem cell sheets transplanted subcutaneously enhance cell retention and survival more than dissociated stem cell injections2023

    • Author(s)
      Mitsuyoshi Nakao, Makoto Matsui, Kyungsook Kim, Nobuhiro Nishiyama, David W. Grainger, Teruo Okano, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • Journal Title

      Stem Cell Research & Therapy

      Volume: 14 Pages: 352

    • DOI

      10.1186/s13287-023-03593-0

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] エチレングリコールを側鎖に有する温度応答性高分子を用いた抗体分離精製用HPLCカラムの開発2024

    • Author(s)
      竹内絢子, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      日本薬学会第144年会(横浜)
  • [Presentation] 温度制御によりエクソソームを精製する機能性微粒子の開発2024

    • Author(s)
      長瀬健一, 山崎開智, 前川祐太朗, 花岡健二郎, 金澤秀子
    • Organizer
      日本薬学会第144年会(横浜)
  • [Presentation] 機能性高分子を用いた温度制御型肝細胞分離カラムの開発2024

    • Author(s)
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤 秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      ライフサポート学会 第33回フロンティア講演会
  • [Presentation] 肝細胞膜との相互作用を用いた温度制御型細胞分離法の開発2024

    • Author(s)
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤 秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第6回生体膜デザインコンファレンス
  • [Presentation] エクソソーム表面膜リン脂質に特異的なペプチドを用いた温度応答性微粒子の開発2024

    • Author(s)
      小暮利彦, 山崎開智, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第6回生体膜デザインコンファレンス
  • [Presentation] 生体膜との相互作用を温度変化で制御する細胞・エクソソーム分離精製法の創出2024

    • Author(s)
      長瀬健一
    • Organizer
      第6回生体膜デザインコンファレンス
    • Invited
  • [Presentation] Temperature-responsive Hepatocyte Separation Column using Thermoresponsive Copolymer Grafted Silica Beads2023

    • Author(s)
      Junnosuke Matsuda, Daimu Inanaga, Mitsuaki Goto, Toshihiro Akaike, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      MRM2023/IUMRS-ICA2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Thermoresponsive Block Copolymer Brush for Hepatocyte Purification2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Naoto Kojima, Mistuaki Goto, Toshihiro Akaike, Kenjiro Hanaoka, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      MRM2023/IUMRS-ICA2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Thermoresponsive Patterned Cell Culture Dish for Fabrication of Anisotropic Mesenchymal Stem Cell Sheet2023

    • Author(s)
      Hasumi Kuramochi, Hironobu Takahashi, David W. Grainger, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      MRM2023/IUMRS-ICA2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Mesenchymal Stem Cell Separation Column using Thermoresponsive Block Copolymer Brush Grafted Silica Beads as Packing Materials2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      MRM2023/IUMRS-ICA2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 温度応答制御型薬物送達システムと革新的細胞治療2023

    • Author(s)
      長瀬健一
    • Organizer
      KEIO TECHNO-MALL 2023
    • Invited
  • [Presentation] Thermoresponsive Mixed Polymer Brush for AAV9 Purification2023

    • Author(s)
      Toshihiko Kogure, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      6th G‘L’owing Polymer Symposium in KANTO
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Thermoresponsive Block Copolymer Brush Grafted Beads Packed Column for Hepatocyte Purification2023

    • Author(s)
      Junnosuke Matsuda, Daimu Inanaga, Mitsuaki Goto, Toshihiro Akaike, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      6th G‘L’owing Polymer Symposium in KANTO
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of Temperature-Responsive Hepatocyte Separation Column2023

    • Author(s)
      Junnosuke Matsuda, Daimu Inanaga, Mitsuaki Goto, Toshihiro Akaike, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      9th Asian Biomaterials Congress 2023 (9th ABMC 2023)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of Thermoresponsive AAV9 Purification Column2023

    • Author(s)
      Toshihiko Kogure, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      9th Asian Biomaterials Congress 2023 (9th ABMC 2023)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Mesenchymal Stem Cell Separation Using Thermoresponsive-Cationic Block Copolymer Brush Modified Beads Packed Column2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      9th Asian Biomaterials Congress 2023 (9th ABMC 2023)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] ホスファチジルセリン特異的ペプチドと温度応答性高分子を用いたエクソソーム精製法2023

    • Author(s)
      小暮利彦, 山崎開智, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第45回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] 配向性細胞シートの作製と機能性向上の検討2023

    • Author(s)
      倉持羽純, 高橋宏信, David Grainger, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第45回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] 温度応答性ポリマーを用いた臍帯由来間葉系幹細胞分離カラムの開発2023

    • Author(s)
      松田潤之介, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第45回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] 肝細胞シートの生着率向上のための細胞増殖因子徐放ナノ粒子の創製2023

    • Author(s)
      長瀬健一, 永岡真凜, 中野雄斗, 鵜頭理恵, 花岡健二郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第45回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] 正電荷導入温度応答性高分子を用いた臍帯由来間葉系幹細胞分離カラムの開発2023

    • Author(s)
      松田潤之介, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第34回クロマトグラフィー科学会議 (福岡)
  • [Presentation] 肝細胞のアシアロ糖タンパク質レセプターとの親和性を温度により制御する肝細胞分離カラム2023

    • Author(s)
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第34回クロマトグラフィー科学会議 (福岡)
  • [Presentation] 温度制御により細胞外小胞を捕捉・回収する機能性微粒子の開発2023

    • Author(s)
      小暮利彦, 山崎開智, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第34回クロマトグラフィー科学会議 (福岡)
  • [Presentation] AAV9を温度制御により精製する温度応答性ウイルスベクター精製カラムの開発2023

    • Author(s)
      小暮利彦, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第34回クロマトグラフィー科学会議 (福岡)
  • [Presentation] 温度応答性高分子を用いた肝細胞分離カラムの開発2023

    • Author(s)
      長瀬健一, 山崎開智, 前川祐太朗, 花岡健二郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第34回クロマトグラフィー科学会議 (福岡)
  • [Presentation] 温度制御型バイオセパレーションを実現する温度応答性混合高分子ブラシの創製2023

    • Author(s)
      長瀬健一, 若山暖乃, 石井咲樹, 花岡健二郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第72回高分子討論会
  • [Presentation] 温度応答性-肝細胞認識高分子共重合体による肝細胞分離法の開発2023

    • Author(s)
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第72回高分子討論会
  • [Presentation] 配向性細胞シートを作製するパターン化温度応答性培養皿の開発2023

    • Author(s)
      倉持羽純, 高橋宏信, Grainger David, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第72回高分子討論会
  • [Presentation] アデノ随伴ウイルス血清9型の精製を目的とした機能性高分子修飾ビーズの創製2023

    • Author(s)
      小暮利彦, 金澤秀子, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第72回高分子討論会
  • [Presentation] 温度応答性高分子を用いた臍帯由来間葉系幹細胞分離法の開発2023

    • Author(s)
      松田潤之介, 岡田明莉, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第67回日本薬学会 関東支部大会
  • [Presentation] 温度応答性高分子を用いたエクソソーム精製法の開発2023

    • Author(s)
      小暮利彦, 山崎開智, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第67回日本薬学会 関東支部大会
  • [Presentation] 抗体精製のための抗体認識高分子を用いた温度応答性固相抽出カラムの開発2023

    • Author(s)
      竹内 絢子, 石井 咲樹, 金澤 秀子, 花岡 健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      日本分析化学会 第72年会
  • [Presentation] 機能性高分子を用いた温度制御型AAV9精製カラムの開発2023

    • Author(s)
      小暮 利彦, 金澤 秀子, 花岡 健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      日本分析化学会 第72年会
  • [Presentation] 温度制御により標的細胞外小胞を分離精製する機能性微粒子の創製2023

    • Author(s)
      長瀬 健一, 山崎 開智, 前川 祐太朗, 花岡 健二郎, 金澤 秀子
    • Organizer
      日本分析化学会 第72年会
  • [Presentation] Hepatocyte Separation Column using Thermoresponsive Block Copolymer with Hepatocyte Affinity Segment2023

    • Author(s)
      Junnosuke Matsuda, Daimu Inanaga, Mitsuaki Goto, Toshihiro Akaike, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      RSC Tokyo International Conference 2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of AAV9 Purification Column using Functional Polymers2023

    • Author(s)
      Toshihiko Kogure, Hideko Kanazawa, Kenjiro Hanaoka, Kenichi Nagase
    • Organizer
      RSC Tokyo International Conference 2023
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 温度制御によるアデノ随伴ウイルスベクター血清9型精製法の開発2023

    • Author(s)
      小暮 利彦, 金澤 秀子, 花岡 健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      第20回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2023)
  • [Presentation] パターン化温度応答性培養皿の作製と配向性細胞シート作製への応用2023

    • Author(s)
      倉持羽純, 高橋宏信, David Grainger, 花岡健二郎, 長瀬健一
    • Organizer
      第20回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2023)
  • [Presentation] 抗体精製のための温度応答性固相抽出カラムの開発2023

    • Author(s)
      竹内絢子, 石井 咲樹, 金澤 秀子, 花岡健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      第20回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2023)
  • [Presentation] 肝細胞との特異的な相互作用を制御する温度制御型肝細胞分離精製カラムの開発2023

    • Author(s)
      松田 潤之介, 稲永 大夢, 後藤 光昭, 赤池 敏宏, 金澤 秀子, 花岡 健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      第20回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2023)
  • [Presentation] 温度応答性-肝細胞認識高分子ブラシを用いた温度制御型肝細胞分離法の開発2023

    • Author(s)
      長瀬 健一, 小島 直人, 後藤 光昭, 赤池 敏宏, 花岡 健二郎, 金澤 秀子
    • Organizer
      第52回医用高分子シンポジウム
  • [Presentation] 機能性高分子修飾ビーズ充填カラムを用いた温度制御型AAV9精製カラムの開発2023

    • Author(s)
      小暮 利彦, 金澤 秀子, 花岡 健二郎, 長瀬 健一
    • Organizer
      第30回クロマトグラフィーシンポジウム
  • [Presentation] Innovative Temperature-modulated Separation of Next-generation Medicines Using Thermoresponsive Polymers2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      HPLC2023-51st International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Thermoresponsive-Hepatocyte Recognizing Block Copolymer Brush for Hepatocyte Separation2023

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Naoto Kojima, Mitsuaki Goto, Toshihiro Akaike, Kenjiro Hanaoka, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      72nd SPSJ Annual Meeting
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 肝細胞の分離分析を実現する機能性高分子修飾界面の創出2023

    • Author(s)
      長瀬健一, 小島直人, 後藤光昭, 赤池敏宏, 花岡健二郎, 金澤秀子
    • Organizer
      第83回分析化学討論会

URL: 

Published: 2024-12-25  

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