2023 Fiscal Year Annual Research Report
迅速な高性能蛍光免疫センサー構築を指向した直交ペプチドペアの高効率スクリーニング
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22K20477
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
安田 貴信 東京工業大学, 科学技術創成研究院, 助教 (90963249)
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| Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2024-03-31
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| Keywords | コイルドコイル / ペプチド / 酵母 / ファージ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、直交ペプチドペアスクリーニングのモデル実験として、E4を提示する酵母とK4を提示するファージを調製して両者を混合し、フローサイトメーターを使って酵母/ファージ複合体の選択を試みた。この時、K4提示ファージを抗M13抗体-PEで標識する場合と、抗M13抗体-HRPとビオチニルチラミドの反応により酵母表面をビオチン化しストレプトアビジン-PEで標識する場合について検討した。いずれの場合でもK4提示ファージ非存在下に比べて存在下でPE由来と思われるシグナルを示す集団が見られた。この集団についてソーティングと培養を行ったのちフローサイトメーターを使った解析を行ったところ、抗M13抗体-PEを用いて標識した場合でE4提示酵母がより高い割合で濃縮されていることを確認できた。
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