2023 Fiscal Year Research-status Report

Elucidation of the mechanism of action of lactoferrin: a novel anti-angiogenic agent in milk

Research Project

Project/Area Number	22K20574
Research Institution	National Agriculture and Food Research Organization
Principal Investigator	高山喜晴国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 食品研究部門, 主席研究員 (00343989)
Project Period (FY)	2022-08-31 – 2025-03-31
Keywords	ラクトフェリン / 血管内皮増殖因子 / 血管新生
Outline of Annual Research Achievements	血管内皮細胞増殖因子-A(VEGF-A)によって誘導される血管新生に対するラクトフェリンの阻害効果と、その分子メカニズムについて検討を行った。ラクトフェリンがケモカイン受容体であるCXCR4を介して、その血管新生阻害効果を発揮しているとの仮説の下に研究をおこなった。この仮説を実証するため、第一にヒト血管内皮細胞(HUVEC)において、CXCR4のアンタゴニストであるAMD3100を添加した場合、もしくはCXCR4の発現を抑制した場合、VEGF-Aによる血管新生が、ラクトフェリン（特に血管新生阻害効果がNローブと比べて顕著であることが確認されているラクトフェリンCローブ断片）によって阻害されるかを、コラーゲンゲル内でVEGF-Aの存在下で包埋培養したHUVECを管腔マーカーであるCD34抗体で免疫染色することにより評価した。第二に、HUVECにおけるVEGF受容体の活性化（リン酸化）が、AMD3100の存在および非存在下で、ラクトフェリンおよびそのCローブ断片により阻害されるか否かについて、生化学的手法を用いて検討をおこなった。しかしながら、これらに対するラクトフェリンの阻害効果は現時点では確認できておらず、ラクトフェリンの血管新生阻害効果がCXCR4を介していることを示す結果は得られていない。したがって、HUVECにおいてはラクトフェリンの血管新生阻害効果は、CXCR4以外のラクトフェリン受容体を介している可能性がある。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 4: Progress in research has been delayed. Reason 当初予定していた、ケモカインSDF-1α（間質細胞由来因子-1α）によって誘導されるヒト臍帯血由来血管内皮細胞(HUVEC)の管腔構造形成に対するラクトフェリンの効果が検証できていないので「遅れている」と判断した。
Strategy for Future Research Activity	次年度移行は、血管内皮増殖因子(VEGF)によって誘導される血管新生に対してラクトフェリンが阻害するか否かを検討する予定である。
Causes of Carryover	研究の進行が遅れているため、試薬など消耗品の購入経費を次年度に繰り越した。