2022 Fiscal Year Research-status Report
孤立性先天性無脾症の新規責任遺伝子の同定と新しい疾患概念の確立
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22K20772
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
浅野 孝基 広島大学, 病院(医), 助教 (50835501)
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2022-08-31 – 2024-03-31
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| Keywords | 孤立性先天性無脾症 / 巨大血小板性血小板減少 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
孤立性先天性無脾症（以下、ICA）は生下時からの脾臓欠損を認める原発性免疫不全症である。現在までに同定されたICAの責任遺伝子は常染色体顕性のRPSA変異のみである。本研究では、「RPSA遺伝子に異常を認めないICA患者の一部は単一遺伝性疾患で説明が可能であり、未知の疾患責任遺伝子が存在する」という仮説のもと検討を行う。予備実験にで４症例で、MPIG6B遺伝子のホモ接合性変異を同定している。ICA以外の免疫不全症コホート解析からは同遺伝子に変異を認めず、遺伝統計学的解析からも本遺伝子変異がICAの新規責任遺伝子となると強く考えられた（p=8.2x10^-11）。また、これらの４症例はICAと巨大血小板性血小板減少の合併という同様の表現型を呈してたことから、本研究では、「MPIG6B遺伝子異常による血小板減少を伴うICA」という新規疾患概念の確率に挑戦する。
①「ICA患者における単一遺伝子異常の同定」としては、既に４症例のICA患者において新規責任遺伝子MPIG6Bのホモ接合性変異を同定しており、遺伝統計学的証明も終了している。追加症例を得るために、ICA＋血小板減少の新規症例リクルートを行なっている。
②「同定されたMPIG6B遺伝子変異の病的意義の解明」のため機能解析実験を進めている。同定された変異はミスセンス変異、ナンセンス変異、スプライス変異であった。スプライス変異に関しては、exon-trapping assayを行い変異がスプライスに与える影響を確認した。同定された全変異について、プラスミド作成を行い現在機能解析実験を試みている。さらに、実際の患者細胞(血小板)を用いたたんぱく発現解析を予定している。MPIG6Bは血小板に主に発現している。患者が遠方であり輸送を含めた適切な実験系の確立が必要とされた。健常者の血小板を用いて輸送を含めた本実験系の確立を済ませた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究のためには、「ICA患者における単一遺伝子異常の同定」、「同定されたMPIG6B遺伝子変異の病的意義の解明」、「MPIG6B遺伝子異常に基づくICA+血小板減少という新規疾患概念の確立」という３つの過程が重要となる。
現在までに、「ICA患者における単一遺伝子異常の同定」としては、既に４症例のICA患者において新規責任遺伝子MPIG6Bのホモ接合性変異を同定しており、遺伝統計学的証明も終了している。追加症例を得るために、ICA＋血小板減少の新規症例リクルートを行なっている。
さらには、「同定されたMPIG6B遺伝子変異の病的意義の解明」のため機能解析実験を進めている。同定された変異はミスセンス変異、ナンセンス変異、スプライス変異であった。スプライス変異に関しては、exon-trapping assayを行い変異がスプライスに与える影響を確認した。同定された全変異について、プラスミド作成を行い現在機能解析実験を試みている。さらに、実際の患者細胞(血小板)を用いたたんぱく発現解析を予定している。MPIG6Bは血小板に主に発現している。患者が遠方であり輸送を含めた適切な実験系の確立が必要とされた。健常者の血小板を用いて輸送を含めた本実験系の確立を済ませている。
また、「MPIG6B遺伝子異常に基づくICA+血小板減少という新規疾患概念の確立」に関しては、次年度から実施に移る予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
前述の様に、機能解析実験、患者細胞を用いた病態解明実験を行なっている最中である。病態解明実験に関しては、実験系の確立を終了し、実際の解析に取り掛かる予定である。
「MPIG6B遺伝子異常に基づくICA+血小板減少という新規疾患概念の確立」に関しては、次年度から実施に移る予定である。
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| Causes of Carryover |
前述にあるように、「同定されたMPIG6B遺伝子変異の病的意義の解明」のため機能解析実験、患者細胞を用いた病態解明実験を行なっている最中である。病態解明実験に関しては、実験系の確立を終了しており、現在患者細胞の取り寄せを行なっており本年度に実際の解析に取り掛かる予定である。これらの過程にて使用予定であった費用の残費を翌年度分使用額として申請する。
引き続く過程である「MPIG6B遺伝子異常に基づくICA+血小板減少という新規疾患概念の確立」に関しては、予定通り次年度から実施に移る予定である。
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Research Products
(10 results)
