2023 Fiscal Year Annual Research Report
硫酸イオン代謝異常が軟骨形成不全症を引き起こすメカニズムの解明とその治療法の探索
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22K21037
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
吉田 侑加 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員 (50966710)
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| Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2024-03-31
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| Keywords | 軟骨 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Slc26a2-KOマウスの上顎骨の軟骨組織を採取し、上顎骨由来の軟骨細胞を用いたin vitroでの検証実験を行った。Slc26a2欠失軟骨細胞におけるFGFR3シグナル分子の活性を比較検討し、軟骨無形成症との関連を検索していく。Slc26a2のホモ変異マウス胎児から経時的 (胎生12.5日から18.5日)に頭蓋顎顔面組織を採取し、μCTや骨格標本による形態学的な解析を行った。上顎骨の組織切片を作製し、HE染色や免疫化学染色、in situ hybridization等により、病理組織学的に解析した。上顎骨の軟骨組織をレーザーマイクロダイセクションにより採取し、RNAシークエンスによるトランスクリプトーム解析を行った。上記で抽出した分子経路について、上顎から採取した軟骨細胞を用いて、in vitroで の検証実験を行った。さらに、軟骨無形成症の原因遺伝子であるFGFR3との関連を検索するために、Slc26a2欠失軟骨細胞におけるFGFR3シグナル分子の活性(MAPK,JAK2/STAT,mTOR)をウエスタンブロットにて野生型と比較検討することで、軟骨形成不全の病因をさらに解明していく。マウス軟骨前駆細胞株にレンチウイルスをトランスフェクションし、Slc26a2ノックダウンを行うと、正常細胞と比較してアポトーシスが亢進することをすでに見出しており、Slc26a2-KOマウスの上顎から抽出した軟骨細胞においてもアポトーシスが亢進してるか検証したうえで、トランスクリプトーム解析で抽出した分子経路阻害剤を治療薬として用いることでアポトーシスが抑制できるか検討した。in vitroでの表現型の回復作用を検証した後、治療薬の中で最も有効性が高い阻害剤をin vivoで応用する予定である。
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