2023 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of neurodevelopmental toxicity caused by low concentration of environmental estrogens and its mechanism
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22KJ0144
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Research Institution | Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine |
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Principal Investigator |
Chen Xing 帯広畜産大学, 畜産学研究科, 特別研究員(DC1)
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2023-03-08 – 2024-03-31
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| Keywords | 環境エストロゲン / ビスフェノール類 / 発達神経毒性 / ゼブラフィッシュ / 内分泌かく乱 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
令和5年度は主に以下の成果を得た。
(1)ゼブラフィッシュ胚に5種のビスフェノール類をそれぞれ曝露し遊泳行動を評価した。曝露は受精後4時間（hpf）に開始し、120 hpfにおいて10分間の明期を4サイクル（連続明期試験）、その後10分間の暗期と10分間の明期を交互に3サイクル（明暗切替試験）行い、行動解析を実施した。評価項目は、連続明期試験における総遊泳距離（TSDL1）、明暗切替試験における明期での総遊泳距離（TSDL2）、暗期での総遊泳距離（TSDD）、および暗期での接触走性 thigmotaxis（T）とした。試験したほとんどの化合物は各パラメーターにわずかに影響を与えたが、BPAFの影響は統計学的に有意であった。詳細には、BPAFは3uMで稚魚のTSDL1、TSDL2、TSDDおよびTをいずれも有意に増加させるとともに、濃度依存的な増加傾向も示した。このことから、BPAよりもエストロゲン活性の高いBPAFにおいて稚魚の過活動と不安様行動が示唆された。
(2)エストロゲン受容体（ER）の標的遺伝子であるCYP19A1bを指標として、17β-エストラジオール（E2）誘導性のCYP19A1b発現に対する阻害効果を測定することにより、ビスフェノール類の抗エストロゲン性を評価した。BPAF、BPA、BPF、BPB、BP C2およびBis-MPは、E2誘導性のCYP19A1b発現を抑制したことから抗エストロゲン作用が示唆された。次いで、インシリコ解析によりゼブラフィッシュERサブタイプのアンタゴニスト様式のホモロジーモデルを構築し、各化合物とのドッキングシミュレーションを行った。その結果、ビスフェノール類のERに対するアンタゴニスト様式の結合特性は、昨年度までに明らかにしたアゴニスト様式の結合特性と異なり、このことはERβ2で顕著であった。したがって、ビスフェノール類のアゴニスト活性とアンタゴニスト活性の区別にERβ2が関与している可能性が示唆された。
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