2023 Fiscal Year Research-status Report
Effective Control of Dengue Vector Mosquitoes Utilizing Viral Resistance Genes
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22KK0060
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
渡辺 幸三 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 教授 (80634435)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
十亀 陽一郎 福島工業高等専門学校, 化学・バイオ工学科, 助教 (60769850)
柳原 未奈 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 特別研究員 (70844942)
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| Project Period (FY) |
2022-10-07 – 2025-03-31
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| Keywords | デング熱 / ウイルス / ネッタイシマカ / 次世代シークエンサー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、以下二つの研究項目を中心に研究を進めた。
研究項目２ 蚊地域集団のウイルス抵抗性遺伝子の多様性評価(フィリピン・インドネシアとの共同研究）：メトロマニラとバンドン近郊のチマヒ市、各世帯の屋内に誘虫紫外線ランプと吸引ファンを備えた電動蚊採捕機を設置し、ネッタイシマカ等の多様な蚊成虫を採取した。採取した蚊サンプルは形態学的に同定した後、RNAlaterに個体ごとに入れて冷凍庫内に保存した。メトロマニラで採取・保存したネッタイシマカ個体から十分な量のDNAを抽出するためのプロトコルを確立し,ウイルス抵抗性遺伝子を含む様々な遺伝子をゲノム全体からランダムに選択して、それらの遺伝的多様性を調べた。具体的には、次世代シーケンサーを使ったddRAD解析により、約１０００遺伝子座を検出し、メトロマニラ内の地域個体群の遺伝的多様性ならびに地域個体群間の遺伝的差異を調べた。
研究項目３「蚊地域集団のデングウイルス感染率・体内濃度と抵抗性遺伝子の関係の検証(フィリピン・インドネシアとの共同研究）」：研究項目２で採取・保存した蚊個体の一部の個体を使って、個体レベルから十分な量のRNAを抽出するためのプロトコルを確立した。インドネシアのバンドンに設置した愛媛大学ーパジャジャラン大学国際共同研究ラボラトリーにおいてデングウイルスの１～４型をそれぞれ定量PCRで検出する実験手法を最適化し、現地でデングウイルスを検出・定量できる体制を整備した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究項目２（蚊地域集団のウイルス抵抗性遺伝子の多様性評価）、研究項目３（蚊地域集団のデングウイルス感染率・体内濃度と抵抗性遺伝子の関係の検証）共にインドネシア、フィリピンにおける蚊採取は順調に行われ、また、採取した蚊から十分な量の核酸（ＤＮＡ，ＲＮＡ）を抽出して、デングウイルスを現地で定量・検出するプロトコルを確立することができた。以上より、概ね順調に進展しているを評価した。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究項目１（蚊ゲノムのウイルス抵抗性遺伝子の網羅的探索）：標的遺伝子を除去する酵素Cas9を発現するネッタイシマカ培養細胞系を構築する。
研究項目３（蚊地域集団のデングウイルス感染率・体内濃度と抵抗性遺伝子の関係の検証）：フィリピンのマニラ首都圏とインドネシアのバンドンを対象にして、ネッタイシマカ体内のデングウイルス感染率・体内濃度と抵抗性遺伝子の関係を検証する。
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| Causes of Carryover |
次年度に行う次世代シークエンシング解析などの高価な解析のための予算を確保しておいた。
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[Journal Article] Genetic structure and Rickettsia infection rates in Ixodes ovatus and Haemaphysalis flava ticks across different altitudes2024
Author(s)
Regilme, M. A. F., Sato, M., Tamura, T., Arai, R., Sato, M. O., Ikeda, S., Watanabe, K.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 19(3)
Pages: e0298656
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] No detectable fitness cost of infection by cell-fusing agent virus in Aedes aegypti mosquitoes2024
Author(s)
Suzuki, Y., Suzuki, T., Miura, F., Reyes, J. I. L., Asin, I. C. A., Mitsunari, W., Mohammad, M. U., Watanabe, K.
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Journal Title
Royal Society Open Science
Volume: 11 (1)
Pages: 231373
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Arbovirus Detection of Adult Female Aedes aegypti for Dengue Surveillance: a Cohort Study in Bandung City, Indonesia2023
Author(s)
Faridah, L., Ekawardhani, S., Fauziah, N., Djati, I. D., Putra, R. E., Watanabe, K.
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Journal Title
Global Medical and Health Communication
Volume: 11 (3)
Pages: 225-233
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] Understanding biology of insect-specific viruses toward controlling arbovirus transmission2023
Author(s)
Yasutsugu Suzuki, Irish Coleen A. Asin, Takahiro Suzuki, Fuminari Miura, Artem Baidaliuk, Jerica Isabel L. Reyes, Mohammad Mosleh Uddin, Sekii Yu, Etienne Simon-Loriere, Louis Lambrechts, Maria Carla Saleh and Kozo Watanabe
Organizer
JSPS Core-to-Core Symposium "Mosquito-borne Disease Control from Ecological Approaches"
Int'l Joint Research
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[Presentation] ネッタイシマカと蚊特異的ウイルスをモデルとした媒介蚊-ウイルス相互作用の理解2023
Author(s)
鈴木康嗣, 鈴木貴大, Jerica Isabel L Reyes, Mohammad Mosleh Uddin, Irish Coleen A. Asin, 三浦郁修, Artem Baidaliuk, Etienne Simon-Loriere, Louis Lambrechts, Maria Carla Saleh, 渡辺幸三
Organizer
第57回日本脳炎ウイルス生態学研究会
