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2011 Fiscal Year Annual Research Report

種特異的性行動を規定するfru遺伝子とfru神経回路の解明

Research Project

Project/Area Number 23220007
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (S)

Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

山元 大輔  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (50318812)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 木村 賢一  北海道教育大学, 教育学部, 教授 (80214873)
Keywords脳・神経 / 発生・分化 / 遺伝学 / 遺伝子 / 細胞・組織
Research Abstract

本研究の主たる目的は、行動様式に見られる種差を、特定の遺伝子の変異によってもたらされる神経回路の変容によって、単一細胞レベルで理解することにある。対象とするのは雄の求愛行動である。遺伝的モデル生物であるDrosophila melanogasterをホストに、求愛行動のマスターコントロール遺伝子とされるfruitless(fru)の推定調節配列を同属別種のsubobscuraから移入し、その配列の制御下に神経回路を構築させることで、求愛行動そのものの「種間移植」を試みる。その上で、求愛行動の種差を規定するニューロンを同定し、行動の進化の基盤となる遺伝子と神経回路の変化を特定することが目標である。
今年度はその第一歩として、ゲノム配列情報のないsubobscuraから、fru遺伝子最遠位側プロモータ上流31kbをクローニングし、その塩基配列を確定した。続いてこの推定調節配列の異なる領域に由来する諸断片とGAL4コード配列とを融合させたminigenes(sub fru 5'-GAL4s)を各種作成し、それを持つキイロショウジョウバエ形質転換系統を多数確立した。形質転換にあたっては、ゲノムの任意の位置に挿入の起こるpPTGALベクターの他、ゲノムにあらかじめ組み込まれたAttP siteに挿入の起こるP[acman]ベクターを用いて、導入したsubobscuraの配列の転写活性化能をin vivoでの機能アッセイによって評価した。すなわち、UAS-fruを介して運動ニューロンにFruタンパク質を発現させると、そのニューロンが雄特異的筋肉であるローレンス筋(MOL)を誘導する能力を獲得することを利用して、subfru5'-GAL4の機能評価を行った。野生型melanogaster雄ではA5節にMOLが一対形成されるのに対し、subobscura雄はDrosophila属で唯一、A4とA5にMOLを有することが知られている種である。このアッセイの結果、少なくともpPTGALベクターを用いた形質転換系統の一部でMOLが二対形成され、この手法で神経細胞の種特異的形質を異種に移植可能であることが明らかとなった。今後、さらに行動形質の解析とニューロンでのGAL4発現パターンの検討をすすめてゆく。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

予定していたsubobscura fru 5'配列約31kbのクローニングに成功し、その全長、あるいは部分配列を用いた7種のtransgenesを作製、それをゲノムに挿入した25の形質転換系統の作出を完了した。

Strategy for Future Research Activity

subobscura fru 5'配列にGAL4を連結したtransgeneを用いてdTrpA1を強制発現させ、温度条件の制御によってconditionalに発現ニューロンの活性化を引き起こす実験を行う。また、subobscuraのfru 5'配列によってGAL4の発現が起こる細胞のうち、melanogasterにおいても本来fruを発現しているニューロンを選別し、それのみ不活化する実験や、両種に共通してfruを発現するニューロンに限定して活性化する実験等を実施し、それを通じてsubobscuraのfru発現ニューロンとmelanogasterのfru発現ニューロンの機能的異同を解明する。

  • Research Products

    (31 results)

All 2012 2011

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (22 results) Book (4 results)

  • [Journal Article] Expression of a desaturase gene, desat1, in neural and nonneural tissues separately affects perception and emission of sex pheromones in Drosophila2012

    • Author(s)
      Bousquet F, Nojima T, Houot B, Chauvel I, Chaudy S, Dupas S, Yamamoto D, Ferveur, J-F
    • Journal Title

      Proc.Natl.Acad.Sci.USA.

      Volume: 109 Pages: 249-254

    • DOI

      10.1073/pnas.1109166108

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An untranslated RNA sequence encoded in the putative regulatory region of fruitless, a major courtship regulator gene of Drosophila2012

    • Author(s)
      Takayanagi S, Toba G, Koganezawa M, Lukacsovich T, Yamamoto D
    • Journal Title

      Intern.J.Biol.

      Volume: 4 Pages: 20-26

    • DOI

      10.5539/ijb.v4n1p20

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 同定介在ニューロンPIの強制活性化による雄の性行動の解発とPIのフェロモン応答性2011

    • Author(s)
      古波津創、小金澤雅之、山元大輔
    • Journal Title

      Aroma Research

      Volume: 46 Pages: 139

  • [Journal Article] 昆虫の性差はここまでわかった2011

    • Author(s)
      山元大輔
    • Journal Title

      生物科学

      Volume: 62 Pages: 203-211

  • [Journal Article] Apoptosis controls the speed of looping morphogenesis in Drosophila male terminalia2011

    • Author(s)
      Kuranaga E, Matsunuma T, Kanuka H, Takemoto K, Koto A, Kimura K-I, Miura M
    • Journal Title

      Development

      Volume: 138 Pages: 1493-1499

    • DOI

      1242/dev.058958

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 自己組織化プロセスの発生遺伝学的検討2012

    • Author(s)
      木村賢一
    • Organizer
      日本化学会第92春季年会
    • Place of Presentation
      慶應義塾大学日吉キャンパス(招待講演)
    • Year and Date
      20120325-20120328
  • [Presentation] longitudinals lacking cooperates with fruitless in generating sexual differences in neuronal structures and behavior2012

    • Author(s)
      Sato K, Toba G, Ito H, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      53^<rd> Drosophila Annual Conference
    • Place of Presentation
      Sheraton Chicago Hotel & Towers. Chicago, USA
    • Year and Date
      20120307-20120311
  • [Presentation] longitudinals lacking cooperates with fruitless in generating sexual differences in neuronal structures and behavior2012

    • Author(s)
      Sato K, Toba G, Ito H, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      第1回東北脳科学ウインタースクール
    • Place of Presentation
      宮城蔵王高原ホテル
    • Year and Date
      20120218-20120219
  • [Presentation] longitudinals lacking cooperates with fruitless in generating sexual differences in neuronal structures and behavior2012

    • Author(s)
      Sato K, Toba G, Ito H, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      "Everything you ever wanted to know about sex" workshop at 53^<rd> Drosophila Annual Conference
    • Place of Presentation
      Sheraton Chicago Hotel & Towers. Chicago, USA
    • Year and Date
      2012-03-10
  • [Presentation] desat1 plays an essential role in the discrimination of courtship targets2011

    • Author(s)
      Nojima T, Bousquet F, Yamamoto D, Ferveur J-F
    • Organizer
      第34回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20111213-20111216
  • [Presentation] Dve-Enhancer responsive cells are involved in male-type sexual differentiation2011

    • Author(s)
      Yi M Y, Minami R, Sakata C, Yamamoto D, Nakagoshi H
    • Organizer
      第34回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20111213-20111216
  • [Presentation] desat1 plays an essential role in the discrimination of courtship targets2011

    • Author(s)
      Nojima T, Bousquet F, Houot B, Yamamoto D, Ferveur J-F
    • Organizer
      2011 Neurobiology of Drosophila meeting
    • Place of Presentation
      Cold Spring Harbor Laboratory, New York, USA
    • Year and Date
      20111003-20111007
  • [Presentation] Subsets of brain neurons required for fully acquiring sexual receptivity in females as determined by behavioral MARCM for spinster gene functions2011

    • Author(s)
      Sakurai A, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      2011 Neurobiology of Drosophila meeting
    • Place of Presentation
      Cold Spring Harbor Laboratory, New York, USA
    • Year and Date
      20111003-20111007
  • [Presentation] The determination of the genomic sequence that defines species differences in a fru-dependent male-specific mascle2011

    • Author(s)
      Takayanagi S, Lukacsovich T, Ote M, Toba G, Yamamoto D
    • Organizer
      22nd European Drosophila Research Conference
    • Place of Presentation
      Calouste Gulbenkian Foundation headquarters, Portugal
    • Year and Date
      20110921-20110925
  • [Presentation] Identification of male-specific interneurons that are activated by a courtship-triggering stimulus in Drosophila2011

    • Author(s)
      Kohatsu S, Yamamoto D
    • Organizer
      22nd European Drosophila Research Conference
    • Place of Presentation
      Calouste Gulbenkian Foundation headquarters, Portugal
    • Year and Date
      20110921-20110925
  • [Presentation] ショウジョウバエ成虫脳における性決定因子doublesex発現ニューロン群に見られる性差2011

    • Author(s)
      木村賢一、小金澤雅之、佐藤千晶、山元大輔
    • Organizer
      日本動物学会第82回大会
    • Place of Presentation
      旭川市大雪クリスタルホール
    • Year and Date
      20110921-20110923
  • [Presentation] ショウジョウバエ求愛行動を解発するfruitless発現神経回路2011

    • Author(s)
      小金澤雅之、山元大輔
    • Organizer
      日本動物学会第82回大会
    • Place of Presentation
      旭川市大雪クリスタルホール
    • Year and Date
      20110921-20110923
  • [Presentation] The identification of proteins for RNA metabolism that is required for long-term courtship memory in Drosophila melanogaster2011

    • Author(s)
      Kimura S, Sunouchi K, Nomoto S, Sakakibara Y, Ito H, Yamamoto D
    • Organizer
      第34回神経科学学会大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20110914-20110917
  • [Presentation] Identifying subsets of brain neurons that affect female sexual receptivity in Drosophila2011

    • Author(s)
      Sakurai A, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      第34回日本神経科学学会大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20110914-20110917
  • [Presentation] fruitless and longitudinals lacking cooperate to generate the brain sexual differences that govern male courtship behavior in Drosophila2011

    • Author(s)
      Sato K, Toba G, Koganezawa M, Yamamoto D
    • Organizer
      第34回日本神経科学大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20110914-20110917
  • [Presentation] Phosphorylation, oligomerization and expression of the Drosophila neural sex determination factor fruitless2011

    • Author(s)
      Toba G, Yamamoto D
    • Organizer
      第34回日本神経科学大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20110914-20110917
  • [Presentation] Sexually dimorphic projection patterns of gustatory neurons in Drosophila forelegs2011

    • Author(s)
      Kimura K-I, Urushizaki A, Sato C, Matsuda R, Yamamoto D
    • Organizer
      8th International Congress of Comparative Physiology and Biochemistry
    • Place of Presentation
      Nagoya Congress Center
    • Year and Date
      20110531-20110605
  • [Presentation] Sexually dimorphic taste neurons on the forelegs in Drosophila melanogaster2011

    • Author(s)
      Kimura K-I, Urushizaki A, Sato C, Matsuda R, Yamamoto D
    • Organizer
      1st Asia-Pacific Drosophila Research Conference
    • Place of Presentation
      チェンタン青年活動センター台湾
    • Year and Date
      20110522-20110525
  • [Presentation] Molecular characterization of the neural sex determination factor fruitless : phosphorylation, self-interaction and expression2011

    • Author(s)
      Toba G, Yamamoto D
    • Organizer
      1st Asia-Pacific Drosophila Research Conference
    • Place of Presentation
      チェンクン青年活動センター台湾
    • Year and Date
      20110522-20110525
  • [Presentation] desat1 plays an essential role in the discrimination of courtship targets2011

    • Author(s)
      Nojima T, Bousquet F, Houot B, Yamamoto D, Ferveur J-F
    • Organizer
      1st Asia-Pacific Drosophila Research Conference
    • Place of Presentation
      チェンタン青年活動センター台湾
    • Year and Date
      20110522-20110525
  • [Presentation] 単一遺伝子、単一ニューロン操作によるショウジョウバエ性行動の解析(シンポジウム)2011

    • Author(s)
      山元大輔
    • Organizer
      第34回日本神経科学大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(招待講演)
    • Year and Date
      2011-09-15
  • [Presentation] ショウジョウバエ求愛歌のパターンを決める司令ニューロン2011

    • Author(s)
      小金澤雅之、山元大輔
    • Organizer
      平成23年度日本動物学会東北支部大会
    • Place of Presentation
      弘前大学農学生命科学部
    • Year and Date
      2011-07-30
  • [Book] 3日で分かる脳,訳(中国語版)(原著:3日で分かる脳ダイアモンド社2001)2012

    • Author(s)
      山元大輔(主編)、夏敏
    • Total Pages
      219
    • Publisher
      上海科学技術文献出版社
  • [Book] 行動はどこまで遺伝するか,訳(韓国語版)(原著:行動はどこまで遺伝するかソフトバンククリエイティブ株式会社2007)2012

    • Author(s)
      山元大輔
    • Total Pages
      206
    • Publisher
      Baba Publishing Co.
  • [Book] 昆虫クチクラ形成の発生遺伝学的検討「次世代バイオミメティクス研究の最前線-生物多様性に学ぶ」(下村政嗣編)2011

    • Author(s)
      木村賢一
    • Total Pages
      114-119
    • Publisher
      シーエムシー出版
  • [Book] 行動遺伝学入門動物とヒトの"こころ"の科学2011

    • Author(s)
      小出剛、山元大輔(編著)
    • Total Pages
      217
    • Publisher
      裳華房

URL: 

Published: 2013-06-26  

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