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2012 Fiscal Year Annual Research Report

絶滅動物の細胞再生および有用遺伝子回収方法の確立

Research Project

Project/Area Number 23248048
Research InstitutionUniversity of Yamanashi

Principal Investigator

若山 照彦  山梨大学, 医学工学総合研究部, 教授 (40360672)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 水谷 英二  山梨大学, 医学工学総合研究部, 助教 (80443034)
Project Period (FY) 2011-04-01 – 2016-03-31
Keywords核移植 / クローン / 絶滅動物 / 染色体
Research Abstract

平成24年度は理化学研究所から山梨大への研究室の異動があったため長期的な実験は中断せざるを得なかったが、条件検討を目的とした小規模な実験を頻繁に行うことができた。特に、2年間室温保存した毛皮からの細胞核の採取方法、および、それらの核を用いた核移植方法に関してはある程度の成果を出せた。毛皮由来クローン胚は低率ではあるが胚盤胞へ発育させることができた。残念ながらそれらの毛皮由来クローン胚を用いたntES細胞の樹立には成功していない。一方、糞中に含まれる細胞あるいは細胞核の回収を試みたが、ほとんど成功しなかった。GFPを指標に糞中から細胞の回収を試みたが、得られたGFP陽性の細胞状の塊には、ヘキスト染色によって、めったに核が含まれていないことが明らかとなった。核のある細胞を選び出す方法の開発が必要である。
また、理化学研究所で研究室の異動直前まで行っていた研究でクローン技術の染色体異常に関する研究は、従来の蛍光顕微鏡を使わないで蛍光色を検出できる装置を開発し、同時にライブセルイメージングを用いたクローン胚の発生の観察で、染色体異常がクローン胚の発生を左右する大きな要因であることを突き止めた。これらの研究は、従来のUVライトによる蛍光色を長期間観察すると胚へのダメージが大きく、産仔を得るのが難しくなってしまうという問題を解決し、観察後も健康な産仔を得る新しい手法として発表することができた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

理化学研究所から山梨大への研究室の異動、および山梨大に建てたマウス飼育施設が騒音対策のため運営が開始できなかったため、さらに飼育環境の不備が頻発したことから、研究を自由に行うことが出来ない状況が続いたため。

Strategy for Future Research Activity

マウス飼育施設の運営が順調に動き始めたため、実験を予定通り行うことが可能となった。理化学研究所から山梨大への引っ越しも無事終わり、従来通り研究を進められると思われる。

  • Research Products

    (10 results)

All 2012 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (5 results) (of which Invited: 5 results)

  • [Journal Article] Gene Expression Profile Normalization in Cloned Mice by Trichostatin A Treatment.2012

    • Author(s)
      Kohda T, Kishigami S, Kaneko-Ishino T, Wakayama T, Ishino F.
    • Journal Title

      Cell Reprogram.

      Volume: 14 Pages: 45-55

    • DOI

      DOI: 10.1089/cell.2011.0062

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Abnormal chromosome segregation at early cleavage is a major cause of the full-term developmental failure of mouse clones2012

    • Author(s)
      Mizutani E, Yamagata K, Ono T, Akagi S, Geshi M, Wakayama T.
    • Journal Title

      Dev Biol.

      Volume: 364 Pages: 56-65

    • DOI

      doi:10.1016/j.ydbio.2012.01.001

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Fluorescence cell imaging and manipulation using conventional halogen lamp microscopy.2012

    • Author(s)
      Yamagata K, Iwamoto D, Terashita Y, Li C, Wakayama S, Hayashi-Takanaka Y, Kimura H, Saeki K, Wakayama T.
    • Journal Title

      PLoS One.

      Volume: 7 Pages: e31638

    • DOI

      doi:10.1371/journal.pone.0031638

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Latrunculin A Can Improve the Birth Rate of Cloned Mice and Simplify the Nuclear Transfer Protocol by Gently Inhibiting Actin Polymerization.2012

    • Author(s)
      Terashita Y, Wakayama S, Yamagata K, Li C, Sato E, Wakayama T.
    • Journal Title

      Biol Reprod

      Volume: 86 Pages: 180 1-6

    • DOI

      doi: 10.1095/ biolreprod.111.098764

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Offspring from mouse embryos developed using a simple incubator-free culture system with a deoxidizing agent.2012

    • Author(s)
      Itoi F, Tokoro M, Terashita Y, Yamagata K, Fukunaga N, Asada Y, Wakayama T.
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 7 Pages: e47512

    • DOI

      doi: 10.1371/journal.pone.0047512.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Development of novel cloning techniques.2012

    • Author(s)
      Teruhiko Wakayama
    • Organizer
      The 9th Annual Meeting of Asian Reproductive Biotechnology Society.
    • Place of Presentation
      Philippines
    • Year and Date
      20121022-20121026
    • Invited
  • [Presentation] 動物クローン技術の現状

    • Author(s)
      若山照彦
    • Organizer
      内閣府生命倫理専門調査会
    • Place of Presentation
      千代田区、東京都
    • Invited
  • [Presentation] マンモスは甦るか?

    • Author(s)
      若山照彦
    • Organizer
      脳心血管抗加齢研究会
    • Place of Presentation
      梅田、大阪府
    • Invited
  • [Presentation] クローン動物の低出産率の原因は何か

    • Author(s)
      若山照彦
    • Organizer
      特定領域研究 「生殖系列の世代サイクルとエピゲノムネットワーク」
    • Place of Presentation
      京都市、京都府
    • Invited
  • [Presentation] マンモスは再生するか?

    • Author(s)
      若山照彦
    • Organizer
      第27回日本生殖免疫学会総会
    • Place of Presentation
      高槻市、大阪府
    • Invited

URL: 

Published: 2015-05-28  

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