可変型遺伝子トラップクローンを利用したＣｒｅ－ｄｒｉｖｅｒマウスの作製

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23300159
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 荒木 正健 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (80271609)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 荒木 喜美 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (90211705) ; 吉信 公美子 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 助教 (20274730) ; 吉木 淳 独立行政法人理化学研究所, バイオリソースセンター, その他 (40212310)
• Project Period (FY): 2011-04-01 – 2014-03-31
• Keywords: 遺伝子 / バイオリソース / 遺伝子改変マウス / Cre driver / X-gal染色 / 国際情報交換 / 多国籍

Research Abstract

平成２４年度に引き続き、X-gal染色を行ったEGTCクローンの中から興味深い発現パターンを示した４クローンにSA-Creを、１０クローンにmERT2をノックインし、新たなCre-driver ES細胞株を作製した。また、１４種類のCre driver ES細胞株(全５４クローン)を用いてキメラマウス作製を試みた。そのうち１４種類全てをカバーする２６クローンについてマウスライン樹立に成功した。
また、新たなCre driverカセットとしてCAGiCE, CAGEiCE, SA-iCEを作製した。これらはCpG配列を無くすと同時に哺乳類の細胞用にコドンを変換したiCreを使用しており、翻訳効率の上昇が期待できる。それぞれEGTCクローンへのノックイン、キメラマウス作製、マウスライン樹立を試みているところである。
平成２４年度の１０種類に続けて、６９種類のCre driverマウスラインを熊大CARDに寄託した。このうち４９種類の精子を理研BRCへ寄託した。残り３０種類については、平成２６年度中に理研BRCへの寄託を行う予定である。
これらのCre driverマウスと、レポーターマウスであるROSA26Rを交配し、得られた産仔のX-gal染色を行った。６ラインについて胎児期の、５７ラインについてアダルトの各臓器のX-gal染色を行っている。
さらに理研BRCと共同で、可変型遺伝子トラップクローンを利用して作製したCre driverマウスラインのデータベース『日本Creリソース・発現データベース』（J-CRED; Japan Cre Resource and Expression Database）を開発し、試験公開を開始した。

Current Status of Research Progress

Reason

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

25年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] The intramembrane proteases Signal-peptide-peptidase-like 2a and b (SPPL2a/b) have distinct functions in vivo. (2014)
  • Author(s): Schneppenheim, J., Hutti, S., Mentrup, T., Lullmann-Rauch, R., Rothaug, M., Engeike, M., Dittmann, K., Dressel, R., Araki, M., Araki, K., Wienands, J., Fluhrer, R., Saftig, P. and Schroder, B.
  • Journal Title: Mol. Cell Biol. Volume: 34 (8) Pages: 1398 - 1411
  • DOI: 24492962
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Database for exchangeable gene trap clones: pathway and gene ontology analysis of exchangeable gene trap clone mouse lines. (2014)
  • Author(s): Araki, M., Nakahara, M., Muta, M., Itou, M., Yanai, C., Yamazoe, F., Miyake, M., Morita, A., Araki, M., Okamoto, Y., Nakagata, N., Yoshinobu, K., Yamamura, K. and Araki, K.
  • Journal Title: Dev. Growth Differ. Volume: 56 (2) Pages: 161 - 174
  • DOI: 24444128
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Autophagy regulation in pancreatic acinar cells is independent of epidermal growth factor receptor signaling. (2014)
  • Author(s): Ozaki, N., Fikuchi, Y., Tomiyoshi, SR., Uehara, H., Ida, S., Wang, J., Araki, K., Sibilia, M., Baba, H., Yamamura, K. and Ohmuraya, M.
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. Volume: 446 (1) Pages: 224 - 230
  • DOI: 24607897
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The kick-in system: a novel rapid knock-in strategy (2014)
  • Author(s): Tomonoh, Y., Deshimaru, M., Araki, K., Miyazaki, Y., Arasaki, T., Tanaka, Y., Kitamura, H., Mori, F., Wakabayashi, K., Yamashita, S., Aaito, R., Itoh, M., Uchida, T., Yamada, J., Migita, K., Ueno, S., Kitaura, H., Kakita, A., Lossin, C., Takano, Y. and Hirose, S.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 9 (2) Pages: e88549
  • DOI: 24586341
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Loss of mTOR complex 1 induces developmental blockage in early T-lymphopoiesis and eradicates T-cell acute lymphoblastic leukemia cells. (2014)
  • Author(s): Hoshii, T., Kasada, A., Hatakeyama, T., Ohtani, M., Tadokoro, Y., Naka, K., Ikenoue, T., Ikawa, T., Kawamoto, H., Fehling, HJ., Araki, K., Yamamura, K., Matsuda, S. and Hirano, A.
  • Journal Title: Proc. Natl. Acad. Sci. USA Volume: 111 (10) Pages: 3805 - 3810
  • DOI: 24567410
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation and analysis of serine protease inhibitor kazal type 3-cre driver mice (2014)
  • Author(s): Sakata, K., Ohmuraya, M., Araki, K., Suzuki, C., Ida, S., Hashimoto, D., Wang, J., Uchiyama, Y., Baba, H. and Yamamura, K.
  • Journal Title: Exp. Anim. Volume: 63 (1) Pages: 45 - 53
  • DOI: 24521862
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] VMAT2 identified as a regulator of late-stage beta-cell differentiation (2014)
  • Author(s): Sakano, D., Shiraki, N., Kikawa, K., Yamazoe, T., Kataoka, M., Umeda, K., Araki, K., Mao, D., Matsumoto, S., Nakagata, N., Andersson, O., Stainier, D., Endo, F., Kume, K., Uesugi, M. and Kume, S.
  • Journal Title: Nat. Chem. Biol. Volume: 10 (2) Pages: 141 - 148
  • DOI: 24316738
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Interaction of CD99 with its paralog CD99L2 positively regulates CD99L2 trafficking to cell surfaces. (2013)
  • Author(s): Nam, G., Lee, YK., Lee, HY., Ma, MJ., Araki, M., Araki, K., Lee, S., Lee, IS. and Choi, EY.
  • Journal Title: J. Immunol. Volume: 191 (11) Pages: 5730 - 5742
  • DOI: 24133166
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] TASK-2: a K2P K(+) channel with complex regulation and diverse physiological functions. (2013)
  • Author(s): Cid, LP., Roa-Rojs, HA., Niemeyer, MI., Gonzalez, W., Araki, M., Araki, K. and Sepulveda, FV.
  • Journal Title: Front Physiol. Volume: 29 July Pages: 198
  • DOI: 23908634
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] HOT1 is a mammalian direct telomere repeat-binding protein contributing to telomerase recruitment. (2013)
  • Author(s): Kappei, D., Butter, F., Benda, C., Scheibe, M., Draskovic, I., Stevense, M., Novo, CL., Basquin, C., Araki, M., Araki, K., Krastev, DB., Kittler, R., Jessberger, R., Londofio-Vallejo, JA., Mann, M. and Buchholz, F.
  • Journal Title: EMBO J. Volume: 32 (12) Pages: 1681 - 1701
  • DOI: 23685356
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Gene-trap mutagenesis using Mol/MSM-1 embryonic stem cells from MSM/Ms mice. (2013)
  • Author(s): Nakahara, M., Tateyama, H., Araki, M., Nakagata, N., Yamamura, K. and Araki, K.
  • Journal Title: Mamm. Genome Volume: 24 Pages: 228 - 239
  • DOI: 23604909
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Novel ROSA26 Cre-reporter knock-in C57BL/6N mice exhibiting green emission before and red emission after Cre-mediated recombination. (2013)
  • Author(s): Hasegawa, Y., Daitoku, Y., Sekiguchi, K., Tanimoto, Y., Mizuno-Iijima, S., Kajiwara, N., Ema, M., Miwa, Y., Mekada, K., Yoshiki, A., Takahashi, S., Sugiyama, F. and Yagami, K.
  • Journal Title: Exp. Anim. Volume: 62 (4) Pages: 295 - 304
  • DOI: 24172193
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 遺伝子トラップマウスを用いたlincRNAの機能解析 (2013)
  • Author(s): 中原舞、山添史雅、柳井千佳、吉信公美子、山村研一、荒木正健、荒木喜美
  • Organizer: 第３６回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 20131203-20131206
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップクローンの進展 (2013)
  • Author(s): 吉信公美子，來海葉子，慶田貴子，古閑 美，中原舞，山村研一，荒木喜美，荒木正健
  • Organizer: 第３６回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 20131203-20131206
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法を用いた骨代謝疾患に関与する新規遺伝子の探索 (2013)
  • Author(s): 大田智美、関本朝久、舩元太郎、黒木修司、中村志保子、山村研一、中原舞、荒木善美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第28回日本整形外科学会基礎学術集会
  • Place of Presentation: 千葉・幕張メッセ
  • Year and Date: 20131017-20131018
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法を用いたLima1/EPLINの骨代謝における機能解析 (2013)
  • Author(s): 黒木修司、関本朝久、舩元太郎、大田智美、中村志保子、山村研一、中原舞、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第28回日本整形外科学会基礎学術集会
  • Place of Presentation: 千葉・幕張メッセ
  • Year and Date: 20131017-20131018
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法で作製したNedd4欠損マウスは骨量減少を示す (2013)
  • Author(s): 舩元太郎、関本朝久、黒木修司、大田智美、中村志保子、山村研一、中原舞、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第28回日本整形外科学会基礎学術集会
  • Place of Presentation: 千葉・幕張メッセ
  • Year and Date: 20131017-20131018
• [Presentation] Analysis of gene-trap mouse lines trapping long non-coding RNA genes. (Part 1) (2013)
  • Author(s): 柳井千佳、山添史雅、中原舞、宮家幹子、森田彩香、荒木美幸、岡本頼幸、伊東春香、山村研一、吉信公美子、荒木正健、荒木喜美
  • Organizer: 第２７回モロシヌス研究会
  • Place of Presentation: 筑波山 江戸家
  • Year and Date: 20130628-20130629
• [Presentation] Analysis of gene-trap mouse lines trapping long non-coding RNA genes. (Part 2) (2013)
  • Author(s): 山添史雅、柳井千佳、中原舞、宮家幹子、森田彩香、荒木美幸、岡本頼幸、伊藤春香、山村研一、吉信公美子、荒木正健、荒木喜美
  • Organizer: 第２７回モロシヌス研究会
  • Place of Presentation: 筑波山 江戸家
  • Year and Date: 20130628-20130629
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法を用いた骨代謝疾患に関与する新規遺伝子の探索 (2013)
  • Author(s): 関本朝久、黒木修司、舩元太郎、大田智美、中村志保子、濱田浩朗、山村研一、中原舞、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第86回日本整形外科学会学術総会
  • Place of Presentation: 広島グリーンアリーナ
  • Year and Date: 20130523-20130526
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法を用いたNedd4の骨代謝における機能解析 (2013)
  • Author(s): 舩元太郎、関本朝久、黒木修司、大田智美、中村志保子、山村研一、中原舞、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第86回日本整形外科学会学術総会
  • Place of Presentation: 広島グリーンアリーナ
  • Year and Date: 20130523-20130526
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップ法を用いたEPLIN遺伝子の骨代謝における機能解析 (2013)
  • Author(s): 黒木修司、関本朝久、舩元太郎、大田智美、中村志保子、山村研一、中原舞、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • Organizer: 第86回日本整形外科学会学術総会
  • Place of Presentation: 広島グリーンアリーナ
  • Year and Date: 20130523-20130526
• [Presentation] 可変型遺伝子トラップクローンを利用したCre-driverマウスの作製 (2013)
  • Author(s): 荒木喜美、森田彩香、宮家幹子、吉信公美子、来海葉子、慶田貴子、古閑成美、中潟直己、村上亜弓、門田雅世、目加田和之、吉木淳、荒木正健
  • Organizer: 第６０回日本実験動物学会総会
  • Place of Presentation: つくば国際会議場
  • Year and Date: 20130515-20130517
• [Remarks] EGTC
  • URL: http://egtc.jp
• [Remarks] J-CRED; Japan Cre Resource and Expression Database
  • URL: https://database.riken.jp/sw/en/Home/cria429s1i/