2011 Fiscal Year Annual Research Report
白血病細胞表層癌関連糖鎖抗原に対する一本鎖抗体の開発とオーダーメード治療への応用
Project/Area Number |
23300356
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Research Institution | Kagoshima University |
Principal Investigator |
隅田 泰生 鹿児島大学, 大学院・理工学研究科, 教授 (70179282)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊東 祐二 鹿児島大学, 大学院・理工学研究科, 教授 (60223195)
有馬 直道 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (30175997)
若尾 雅広 鹿児島大学, 大学院・理工学研究科, 助教 (20404535)
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Keywords | 腫瘍マーカー / オーダーメード治療 |
Research Abstract |
癌細胞表層の糖鎖を標的とした抗体を調製し、構造解析用試薬、検査薬、さらに治療薬として使用することを目的として本研究を遂行している。白血病細胞表層に特異的に発現している糖鎖を腫瘍マーカーおよび抗体(免疫)療法のターゲット抗原としてとらえ、腫瘍細胞から抽出・分画する微量糖鎖を直径50μm程度の光ファイバーの先端に固定化したシュガーチップと局在プラズモン共鳴法(LPR)を用いたスクリーニング法を用い、ファージ・ディスプレイ法によって、それら糖鎖に特異的に結合する1本鎖抗体(scFv)を発現しているファージ(ファージミドベクター)群を選別し、さらにscFvを産生・蓄積する。対象とする白血病細胞としては、まず成人T細胞白血病(ATL)細胞から開始し、他の白血病細胞へ展開する。これらによって、ファージミドベクターとscFvのプール(目標数:各々100)が得られ、同時に使用した細胞の特徴的な遺伝子や患者の症状を調べて、データベースを構築し、オーダーメード治療用の抗体医薬の開発に応用する。また、scFvを固定化した蛍光性の、または近赤外光で発光するナノ粒子を開発し、白血病患者の早期発見のための検査薬を創製する。 この研究戦略に従って、本年度はライン化ATL細胞(SIT)由来O-型糖鎖に対するscFv発現ファージのスクリーニングをおこない、SITには結合するが、ATLではない白血病細胞株MOLT4には結合しないscFvを3種類単離できた。また、超低毒性の蛍光性ナノ粒子の調製法を確立し、また糖鎖や蛋白質の固定化にも成功した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
細胞からの糖鎖の切り出し、ファイバー型シュガーチップへの固定化、それを用いたスクリーニング法など方法論は確立できた。しかし、ファージからscFvを産生させ単離・精製すると、scFv自体の安定性が低下し、細胞との結合活性が著しく低下する場合が多いことがわかってきた。そのため、活性のあるscFvは3種類ほどしか単離できなかった。しかし、以下の通り解決法がわかったので、今後はペースを上げることができると考えている。
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Strategy for Future Research Activity |
上述の問題点は、scFvを単離せず、まずファージに担持させた形で細胞との結合活性を調べ、結合するファージのscFv部分の遺伝子解析を行う事によって解決する。活性を持ちかつ遺伝子の異なるファージを多数選択することにより、ATL患者由来の細胞との結合実験を直接行うことも可能となる。蛍光性ナノ粒子については、予定どおり研究を進める。
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[Journal Article] SUPER HIGH SENSITIVE DETECTION OF VIRUSES USING SUGAR-CHAIN IMMOBILIZED GOLD NANO-PARTICLES (SGNPs)2012
Author(s)
Xu Zhang, Sachiko Nakamura-Tsuruta, Mami Haruyama, Risa Yokoyama, Mami Nagatomo, Masahiro Wakao, Kazuhiko Nakajima, Kazue Aoyama, Toshiomi Okuno, Saeko Morikawa, Satoshi Hiroi, Tetsuo Kase, Hirohisa Nose, Jun-ichiro Nishi, Mika Okamoto Masanori Baba Yasuo Suda
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Journal Title
Polymer Preprints
Volume: 53(1)
Pages: 671-672
Peer Reviewed
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[Journal Article] A mimotope peptide of Abeta42 fibril-specific antibodies with Abeta42 fibrillation inhibitory activity induces anti-Abeta42 conformer antibody response by a displayed form on an M13 phage in mice2011
Author(s)
Tanaka, K., Nishimura, M., Yamaguchi, Y., Hashiguchi, S., Takiguchi, S., Yamaguchi, M., Tahara, H., Gotanda, T., Abe, R., Ito, Y., Sugimura, K.
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Journal Title
J.Neuroimmunol.
Volume: 236
Pages: 27-38
Peer Reviewed
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[Journal Article] Novel cytotoxic isolated from Jamaicn Hyptis verticillata jacq induces apoptosis and overcomes multidrug resistance2011
Author(s)
White Y, Hamada T, Yoshimitsu M, Nakashima M, Hachiman M, Kozako T, Matsushita K, Uozumi K, Suzuki S, Kofune H, Furukawa T, Arima N
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Journal Title
AntiCancer Eesearch
Volume: 31
Pages: 4251-4258
Peer Reviewed
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[Journal Article] Target epitopes of HTLV-1 recognized by class I MHC-restricted cytotoxic T lymphocytes in patients with myelopathy and spastic paraparesis and infected patients with autoimnume disorders2011
Author(s)
Kozako T, Akimoto M, Toji S, White Y, Suzuki S, Arima T, Suruga Y, Matsushita K, Shimemo H, Soeda S, Kubota R, Izumo S, Uozumi K, Arima N
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Journal Title
J Med Virol
Volume: 83
Pages: 1358-1366
Peer Reviewed
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[Presentation] Super high sensitive detection of viruses using sugar-chain immobilized gold nanoparticles (SGNPs)2012
Author(s)
Xu Zang, Sachiko Nakamura Tsuruta, Mami Haruyama, Risa Yokoyama, Mami Nagatomo, Masahiro Wakao, Kazuhiko Nakajima, Kazue Aoyama, Toshiomi Okuno, Saeko Morikawa, Satoshi Hiroi, Tetsuo Kase, Hirohisa Nose, Jun-ichiro Nishi, Mika Okamoto, Masanori Baba, Yasuo Suda
Organizer
243^<rd> American Chemical Society National Meeting & Exposition
Place of Presentation
San Diego, California
Year and Date
2012-03-27
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[Presentation] 糖鎖固定化蛍光性ナノ粒子の細胞結合性2012
Author(s)
新地浩之, 坂本雅弥, 永田野々香, 若尾雅広, 望月衛子, 上松太郎, 桑畑進, 隅田泰生
Organizer
日本化学会第92春季年会(2012),平成24年3月25日-28日
Place of Presentation
慶應義塾大学日吉キャンパス・矢上キャンパス,神奈川県横浜市(口頭2D3-12)
Year and Date
2012-03-26
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[Presentation] 糖鎖固定化蛍光性ナノ粒子の毒性評価2012
Author(s)
若尾雅広, 永田野々香, 新地浩之, 坂本雅弥, 望月衛子, 上松太郎, 桑畑進, 隅田泰生
Organizer
日本化学会第92春季年会(2012),平成24年3月25日-28日
Place of Presentation
慶應義塾大学日吉キャンパス・矢上キャンパス,神奈川県横浜市(口頭2D3-13)
Year and Date
2012-03-26
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[Presentation] Preparation and application of sugar-chain immobilized fluorescence nanoparticles containing ZnS-AgInS2/ZnS core/shell structure2011
Author(s)
H.Shinchi, S.Nakagawa, M.Sakamoto, N.Nagata, M.Wakao, E.Mochiduki, T.Uematsu, S.Kuwabata, Y.Suda
Organizer
Japan-Taiwan Bilateral Workshop on Nano-Science 2011,2011年11月21-22日
Place of Presentation
Wah-Lee Hall, B1, Dept.of Chem.Eng., National Cheng Kung University, Taiwan(ポスターP-51/口頭selected students, abstract p.88)
Year and Date
20111121-20111122
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[Presentation] Application of sugar-chain immobilized nano-particles to developantibodies for viral protein2011
Author(s)
Hiroyuki Kariya, Mami Nagatomo, Masahiro Wakao, Masahito Hashimoto, Yasuo Suda
Organizer
Japan-Taiwan Bilateral Workshop on Nano-Science 2011,2011年11月21-22日
Place of Presentation
Wah-Lee Hall, B1, Dept.of Chem.Eng., National Cheng Kung University, Taiwan(口頭0-25, abstract p.34)
Year and Date
2011-11-22
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[Presentation] Development of single chain Fv antibody (scFv) which recognizes sugar-chains on ATL cell surface for targeted therapy2011
Author(s)
Ayaka Sato, Kenji Iwakiri, Mamikijiyama, Xhieri Maehara, Masahiro Wakao, Naomichi Arima, Yuji Ito, Yasuo Suda
Organizer
Japan-Taiwan Bilateral Workshop on Nano-Science 2011,2011年11月21-22日
Place of Presentation
Wah-Lee Hall, B1, Dept.of Chem.Eng., National Cheng Kung University, Taiwan)(ポスターP-53,abstract p.90)
Year and Date
2011-11-21
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[Presentation] Synthetic Study on Chondoroitin Sulfate Tetrasaccharaide Partial Structure2011
Author(s)
Yukiko Ichiki, Chiho Sakami, Yuhei Kakitsubata, Masahiro Wakao, Yasuo Suda
Organizer
Japan-Taiwan Bilateral Workshop on Nano-Science 2011,2011年11月21-22日
Place of Presentation
Wah-Lee Hall, B1, Dept.of Chem.Eng., Nat ional Cheng Kung University, Taiwan(ポスターP-52,abstract p.89)
Year and Date
2011-11-21
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[Presentation] Expression on Staphylococcus aureus lipoproteins in various conditions2011
Author(s)
Keiko Ono, Hiroyuki Kariya, Kazuki Tawaratsumida, Yasuo Suda, Masahito Hashimoto
Organizer
Japan-Taiwan Bilateral Workshop on Nano-Science 2011,2011年11月21-22日
Place of Presentation
Wah-Lee Hall, B1, Dept.of Chem.Eng., National Cheng Kung University, Taiwan(ポスターP-49, abstractp.86)
Year and Date
2011-11-21
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[Presentation] 糖鎖固定化金ナノ粒子を用いたインフルエンザウイルスの高感度検出の応用(An application of high sensitive detection of Influenza virus using sugar-chain immobilized gold nano-particles)2011
Author(s)
張旭, 篠田直, 芦田延久, 鷺谷敦廣, 弘田辰彦, 山本直之, 横山理沙, 永友真未, 隅田泰生
Organizer
第84回日本生化学会大会 平成23年9月21日-24日
Place of Presentation
国立京都国際会館,京都府京都市(ポスター4P-0599,予稿集p.218)
Year and Date
2011-09-24
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[Presentation] 一酸化窒素誘導に関与する根粒菌リポ多糖由来リピドAの解析2011
Author(s)
橋本雅仁, 谷下洋平, 隅田泰生, 村上英一, 永田真紀, 丸町健一, 阿部美紀子, 内海俊樹
Organizer
第84回日本生化学会大会 平成23年9月21日-24日
Place of Presentation
国立京都国際会館,京都府京都市(ポスター3P-0014,予稿集p.154・口頭3T8a-18,予稿集p.97)
Year and Date
2011-09-23
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[Presentation] 糖鎖固定化蛍光性ナノ粒子を用いた相互作用解析と生物学的評価2011
Author(s)
新地浩之, 中川奨, 永田野々香, 坂本雅弥, 若尾雅広, 望月衛子, 上松太郎, 桑畑進, 隅田泰生
Organizer
第84回日本生化学会大会,平成23年9月21日-24日
Place of Presentation
国立京都国際会館,京都府京都市(ポスター3P-0496,予稿集p.180・口頭3T15P-16,予稿集p.107)
Year and Date
2011-09-23
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[Presentation] 成人T細胞白血病(ATL)細胞表層の糖鎖に結合する一本鎖抗体(scFv)の開発2011
Author(s)
佐藤綾香, 岩切健二, 仮屋博敬, 木地山真実, 前原千恵里, 岡田摩耶, 戎義子, 若尾雅広, 有馬直道, 伊東祐二, 隅田泰生
Organizer
第84回日本生化学会大会,平成23年9月21日-24日
Place of Presentation
国立京都国際会館,京都府京都市(ポスター3P-0490,予稿集p.180)
Year and Date
2011-09-23
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[Presentation] ヘパラン硫酸部分構造ライブラリーの構築に向けた二糖ビルディングブロックの合成研究2011
Author(s)
若尾雅広, 斎藤彰寛, 春山まみ, 大石紘, 松山奈央, 出口弘史, 馬渡彩, 隅田泰生
Organizer
第30回日本糖質学会年会,平成23年7月11-13日
Place of Presentation
長岡リリックホール,ハイブ長岡,新潟県長岡市(口頭B4-01,予稿集p.56)
Year and Date
2011-07-13
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[Presentation] 糖を使ったナノテクでウイルスを測る2011
Author(s)
隅田泰生
Organizer
4/17 Science Cafe in Ooita特別版,独立行政法人・科学技術振興機構JSTイノベーションサテライト宮崎主催
Place of Presentation
大分文化会館2F502会議室,大分県大分市(招待講演)
Year and Date
2011-04-17
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