2013 Fiscal Year Annual Research Report
白血病細胞表層癌関連糖鎖抗原に対する一本鎖抗体の開発とオーダーメード治療への応用
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23300356
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
隅田 泰生 鹿児島大学, 理工学研究科, 教授 (70179282)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
若尾 雅広 鹿児島大学, 理工学研究科, 助教 (20404535)
有馬 直道 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (30175997)
伊東 祐二 鹿児島大学, 理工学研究科, 教授 (60223195)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | 腫瘍マーカー / オーダーメード治療 |
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| Research Abstract |
本研究では第一にATL 細胞表層の糖鎖に特異的に結合する一本鎖抗体 (scFv) を調製した。まず、ATL患者から樹立したS1T細胞の表層からO型糖鎖を切り出し、BlotGlyco 法によって捕捉、独自開発の蛍光性リンカーで糖鎖を修飾した。3つのﾌﾗｸｼｮﾝ分画し、各ﾌﾗｸｼｮﾝを、先端を金ナノ粒子で表面修飾した光ファイバーに固定化して、ファイバー型シュガーチップを調製した。このﾁｯﾌﾟを用いて、ヒトB細胞由来のナイーブ一本鎖抗体（scFv）ﾌｧｰｼﾞﾗｲﾌﾞﾗﾘからﾌｧｰｼﾞのｽｸﾘｰﾆﾝｸﾞ（バイオパニング）を行い、非ATL白血病細胞であるMOLT4 細胞に結合せず、S1T 細胞に強く結合する1クローンのscFvを得た。このscFvは、ATL細胞（MT2、 K3T、 su9T01）に高い結合性があり、非ATL細胞（HL60、 CEM、 Jurkat）では、ほとんど結合性がない、または低かったことから、ATLに優先的に結合していることが示唆された。しかし、PBMCにも結合することが分かったため、ｽｸﾘｰﾆﾝｸﾞの際にPBMC由来の糖鎖を固定化したビーズを用いたネガティブセレクションを組み入れて、さらに実験を進めている。
蛍光性ナノ粒子（FNP）は、主に半導体無機材料からなる直径数ﾅﾉﾒｰﾄﾙの粒子状の物質で、紫外線の照射により強い蛍光を発する。本研究では、ATLの新規の診断ツールの開発をも目指し、FNP上にscFvを固定化したscFv固定化FNP（scFv-FNP）の開発を行い、ATL細胞に対する結合性について評価した。すなわち、scFvをNTA、ニッケル、Hisタグを介して固定化したscFv-FNP は、FACS解析と共焦点顕微鏡による蛍光観察により、再現性よく、S1T細胞に結合性を示し、非ATL細胞であるCEM細胞には結合性を示さなかった。この研究結果に基づき、より低毒性の金属で構成されたナノ粒子を用いたscFv-FNPの開発と、これらを用いたATL診断薬・ﾌﾟﾛｰﾌﾞとして応用を図る。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Ramsay Hunt syndrome in a girl with acute lymphoblastic leukemia during maintenance therapy2013
Author(s)
Kodama Y, Okamoto Y, Nishi J, Hashiguchi S, Yamaki Y, Kurauchi K, Tanabe T, Shinkoda Y, Nishikawa T, Suda Y, Kawano Y
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Journal Title
J Pediatr Hematol Oncol
Volume: 35
Pages: 224-225
DOI
Peer Reviewed
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