2013 Fiscal Year Annual Research Report
イネのいもち病抵抗性の分子メカニズム～２つの生物間で何が起こっているのか～
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23380024
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
曾根 輝雄 北海道大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (00333633)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺内 良平 公益財団法人岩手生物工学研究センター, 生命科学研究部, 研究部長 (50236981)
尾瀬 農之 北海道大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (80380525)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | イネいもち病菌 / 抵抗性 / 相互作用 / タンパク構造解析 |
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| Research Abstract |
Pia/AVR-Pia相互作用の時間・空間的位置の特定：AVR-Pia遺伝子の発現時期に関する検討を行った．AVR-PiaのプロモーターにGFP遺伝子を連結させたコンストラクトをいもち病菌に導入し，その発現を調べたところ，付着器及び侵入菌糸でその発現が確認された．より正確に発現の開始について調べるため，付着器は形成するがイネ細胞に侵入できないpls1変異株を作成し，そこに同構造を導入して調べたところ，付着器内でのAVR-Piaの発現が確認され他．従って，AVR-Piaはイネ細胞への侵入以前にその発現を開始していることが明らかとなった．
Pia/AVR-Pia 相互作用の構成要素の解明：AVR-Piaを認識するイネ抵抗性タンパク質Piaの機能解明を進めた。植物一過的過剰発現実験において、RGA4の過剰発現が細胞死を誘導すること、RGA4とRGA5の共発現によってRGA4の細胞死効果が抑制される傾向が再確認された(論文準備中)。一方，AVR-Pia同士の相互作用を弱めた変異体を作成することに成功した．この変異体はY2HではRGA5とは相互作用するが，その変異を導入したイネいもち病菌はPiaイネの抵抗性誘導に変化が見られた．
Pia/AVR-Pia相互作用の構造生化学的解明：当初は単量体構造として解析したが，Y2Hの結果はAVR-Piaが多量体形成を行う可能性を示しているため，パルスプログラムを導入したところ，最大で二量体である結果を示したが，さらに全て同位体ラベルしてある試料，あるいは同位体ラベルした標品としていない標品を巻き戻し調製時に当モル混合を行い，２量体の構造解析を行っている．
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Heterologous production, purification, and immunodetection of Magnaporthe oryzae avirulence protein AVR-Pia2014
Author(s)
Y. Satoh, S. Miki, T. Ose, A. Oikawa, K. Maenaka, R. Terauchi, K. Asano and T. Sone
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Journal Title
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry
Volume: (in press)
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[Presentation] Expression analysis of AVR-Pia, avorulence gene of Magnaporthe oryzae2013
Author(s)
Sornkom, W., Takeuchi, S., Miki, S., Satoh, Y., and Sone, T.
Organizer
International Rice Blast Conference
Place of Presentation
Ramada Plaza Jeju Hotel, Jejudo, South Korea
Year and Date
20130820-20130824
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[Presentation] Recombinnt AVR-Pia Protein: Structure, biological activity, and application for immunological detection of native AVR-Pia in Magnaporthe oryzae2013
Author(s)
Satoh, Y., Ose, T., Kamiya, M., Terauchi, R., and Sone, T.
Organizer
International Rice Blast Conference
Place of Presentation
Ramada Plaza Jeju Hotel, Jejudo, South Korea
Year and Date
20130820-20130824
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[Presentation] Toward understanding evolution and function of Magnaporthe oryzae effectors AVR-Pia, AVR-Pii and AVR-Pik2013
Author(s)
Terauchi, R., Saitoh, H., Kanzaki, H., Fujisaki, K., Takagi, H., Yoshida, K., and Kamoun, S.
Organizer
International Rice Blast Conference
Place of Presentation
Ramada Plaza Jeju Hotel, Jejudo, South Korea
Year and Date
20130820-20130824
Invited
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