2013 Fiscal Year Annual Research Report
タンパク質間相互作用部位をターゲットとした新規バイオ医薬品の開発
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23390140
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
伊藤 孝司 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (00184656)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
広川 貴次 独立行政法人産業技術総合研究所, 生命情報工学研究センター, 研究チーム長 (20357867)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | ドラックデリバリー / リソソーム病 / 組換えカイコ / ケミカルシャペロン / 酵素補充療法 / タンパク間相互作用 / リソソーム酵素 / iPS細胞 |
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| Research Abstract |
リソソーム内で複合体を構成するヒト・カテプシンA（CathA）とノイラミニダーゼ1（NEU1）の遺伝的欠損症（リソソーム病）に対し、両者の相互作用部位をターゲットとする新規治療薬を開発する目的で研究を実施した。H24年度までに活性型CathAを大量発現するトラスジェニック（Tg）カイコの作製に成功し、その中部絹糸腺から精製した成熟型CathAは、ヒトと類似したN型糖鎖を２本もつが、患者組織内への取り込みに必要な末端マンノース-6-リン酸（M6P）残基を含まないことを示した。そこでH25年度は、Tgカイコ由来精製CathA、N型糖鎖の転移反応を触媒する改変型endoM酵素及び均一な高マンノース型またはM6P含有糖鎖のオキサゾリン誘導体を用い、CathAに付加されるN型糖鎖と均一糖鎖のオキサゾリン誘導体とを部分的に挿げ替えることに成功した。このネオグライコCathAは、CathA欠損症患者由来細胞に対する補充効果（有効性）を示すことが期待された。
また昨年度までにCathA欠損症患者由来iPS細胞株の樹立に成功しており、H25年度は、同患者iPS細胞から、神経幹細胞及び神経前駆細胞を得て、より成熟した神経細胞を誘導する分化条件を確立した。本分化誘導系は、上記のネオグライコCathAの補充効果や有効性を評価するために有用と考えられた。
一方H25年度は、ヒト及びCHO細胞にNEU1を含む発現ベクターを導入することにより細胞内でNEU1結晶様構造が形成されることを明らかにし、その単離法を確立した。またTgカイコ由来成熟型CathAと共存させることにより、NEU1の活性化に成功した。今後、X線自由電子ビームを用いる結晶構造解析を行い、NEU1の３次構造とCathAとの相互作用を構造生物学的に解明する。さらにヒト細胞質性NEU2に対し酸性pH条件下で安定化作用を示すSiastatinBのNEU1結晶に対する作用を解析し、その誘導体のNEU1活性に対する増強作用も検討していく。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(46 results)
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[Journal Article] Combination with a defucosylated anti-HM1.24 monoclonal antibody plus lenalidomide induces marked ADCC against myeloma cells and their progenitors.2013
Author(s)
Takeshi Harada, Shuji Ozaki, Asuka Oda, Daisuke Tsuji, Akishige Ikegame, Masami Iwasa, Kengo Udaka, Shiroh Fujii, Shingen Nakamura, Hirokazu Miki, Kumiko Kagawa, Yoshiaki Kuroda, Shigeto Kawai, Kouji Itou, Hisafumi Yamada-Okabe, Toshio Matsumoto and Masahiro Abe
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 26
Pages: No.8(12)
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Establishment of patient-derived iPS cells with neurodegenerative lysosomal storage diseases and application for evaluating lysosomal enzyme replacement effects on differentiated neural cells.
Author(s)
Kouji Itou, Daisuke Tsuji, Mariko Ikuo, Keisuke Kitakaze, So-ichirou Nishioka, Izumi Imataki, Saeka Yamaguchi, Yasunori Chiba, Hitoshi Sakuraba, Isao Kobayashi, Hideki Sezutsu and Hiroaki Machii
Organizer
The IUBMB 10th International Symposium on Cell Surface Macromolecules
Place of Presentation
Saha Institute of Nuclear Physics,Kolkata(India)
Invited
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[Presentation] Molecular properties of recombinant human lysosomal enzyme produced by transgenic silkworm and therapeutic potential for lysosomal storage disease.
Author(s)
Kouji Itou, Daisuke Tsuji, So-ichirou Nishioka, Syunsuke Ikedo, Tetuya Higashi, I Kobayashi, H Sezutsu, A Ishii, K. Harazono, M. Tada, Nana Kawasaki and Hiroaki Machii
Organizer
Gordon Research Conference 2013 Lysosomal Diseases
Place of Presentation
Renaissance Tuscany Il Ciocco Resort ,Lucca(Italy)
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[Presentation] メタノール資化性酵母発現系を用いた組換えマンノース6リン酸受容体の精製とその応用
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第52回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中国四国支部学術大会
Place of Presentation
愛媛大学（愛媛県）
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[Presentation] GM2ガングリオシド蓄積症モデルマウス由来単球系細胞におけるアクチン重合系と浸潤性の変動
Author(s)
幾尾 真理子, 齋藤 裕樹, 大前 陽輔, 毛 瀚, 長野 源太郎, 藤幸 知子, 沼田 俊介, 韓 笑, 小幡 佳津明, 長谷川 節雄, 山口 博樹, 猪口 孝一, 伊藤 輝代, 平松 啓一, 伊藤 孝司, 関水 和久, 垣内 力
Organizer
第86回日本生化学会大会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（神奈川県）
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[Presentation] ガラクシアリドーシス治療薬候補としてのトランスジェニックカイコ由来ヒトカテプシンAの解析
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第86回日本生化学会大会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（神奈川県）
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[Presentation] バイオ医薬品の生産基材としてのトランスジェニックカイコとネオグライコバイオロジクス創製への応用
Author(s)
伊藤 孝司, 小林 巧, 西岡 宗一郎, 原園 景, 久保 勇樹, 真板 宣夫, 辻 大輔, Md Motiiur RAHMAN, 池戸 駿介, 石井 明子, 川崎 ナナ, 町井 博明, 瀬筒 秀樹
Organizer
第32回日本糖質学会大会
Place of Presentation
大阪国際交流センター （ 大阪府）
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[Presentation] ガラクシアリドーシス治療薬候補としてのトランスジェニックカイコ由来ヒトカテプシンAの解析
Author(s)
西岡 宗一郎, 小林 功, 辻 大輔, 池戸 駿介, Md.RAHMAN Motiur, 東 哲也, 真板 宣夫, 瀬筒 秀樹, 町井 博明, 原園 景, 石井 明子, 川崎 ナナ, 伊藤 孝司
Organizer
第54回日本生化学会中国・四国支部例会
Place of Presentation
徳島大学（徳島県）
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