2011 Fiscal Year Annual Research Report
神経系腫瘍幹細胞の放射線抵抗性と分化に対する重粒子線照射の影響
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23390304
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
長谷川 正俊 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (50251111)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大野 達也 群馬大学, 学内共同利用施設等, 教授 (10344061)
加藤 真吾 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (00370875)
片山 絵美子 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (00596950)
井上 和也 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (20596952)
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| Keywords | 癌幹細胞 / 神経幹細胞 / 放射線抵抗性 / cDNAアレイ解析 / アポトーシス / p53 / 膠芽腫 |
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| Research Abstract |
１）放射線感受性，遺伝子発現と幹細胞との関係を明らかにする目的で，p53野生型の上衣芽腫，p53変異型の膠芽腫をヌードマウス皮下に移植して，Ｘ線，炭素イオン線（290MeV/u, 6 cm-SOBP, NIRS），1Gy, 2Gy, 8Gy, 16Gy, 24Gyの１回照射をおこない，４，６，24時間後に腫瘍を摘出して，RNAを抽出してcDNAアレイ解析，階層型クラスタリング，Gene Ontology解析，Pathway解析，リアルタイムPCRを実施した。さらにフォルマリン固定，パラフィン包埋切片でH.E.染色による病理組織学的検討、アポトーシス誘発の頻度の検討を行った。これまでの解析で， p53変異型の膠芽腫においては，2Gy照射後６時間における遺伝子発現は非照射対照群とほぼ同様で変動が乏しかったが，8Gyおよび16Gy照射群では，４～６時間後，さらに24時間後に遺伝子発現の変動（上昇，低下）がみられ，特に炭素イオン線16Gy照射後で最も明瞭で，しかもX線と炭素イオンでは多少異なる傾向も認めた。p53野生型の上衣芽腫では，p53, Bax, Fas, TRAIL, PI3K等の変動を認め，同時に高率なアポトーシス誘発も確認したが，膠芽腫ではこれらに有意な変化を認めず，p53R2, p70S6K, TRAIL-R, NF-kB, IkBa, IAP, STAT, HSP, VEGF等の発現変動を認め，アポトーシス抑制，生存，その他に関係する経路の関与が示唆された。
２）Ｘ線，重粒子線の照射による増殖遅延，再増殖の有無と組織学的変化，遺伝子発現との相関を検討する目的で，X線1, 2, 4, 8, 12, 16Gyをヌードマウス皮下の移植腫瘍に照射後，腫瘍径の計測を実施した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
DNAアレイ解析，組織標本作製等を含めておおむね順調に進んでいる。ヌードマウス移植腫瘍の増大がやや遅く，実験期間が多少延長したために，増殖遅延計測、DNAアレイ解析後の免疫組織化学，リアルタイムPCR等、一部の実験を24年度に繰り越したが，ほぼ計画どおりの研究が実施できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
特に大きな問題はなく，平成23年度からに平成24年度に繰り越した研究も実施できているので，基本的には当初の計画どおり研究をすすめていく。
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Research Products
(2 results)
