2014 Fiscal Year Annual Research Report
変形性関節症の新規動物モデルの提示と治療法開発への基礎研究
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23390369
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
井尻 幸成 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 客員研究員 (00315417)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
榊間 春利 鹿児島大学, 医学部, 教授 (10325780)
小宮 節郎 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (30178371)
永野 聡 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 講師 (50373139)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 軟骨細胞 / Gadd45beta / C/EBPbeta / 変形性関節症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Gadd45beta (growth arrest and DNA damage inducible 45 beta)はストレス応答分子で、細胞周期やApoptosisに関与する。成長板の肥大軟骨細胞においては発現亢進し、そのマーカー遺伝子のMMP13やCol10A1遺伝子発現を調整する。その分子生物学的メカニズムに注目して研究を行ってきた。
Gadd45betaは軟骨細胞において発現亢進しMTK1/MKK3/6/p3を介する。C/EBPbetaはGadd45betaを介してリン酸化され活性化し、COL10A遺伝子の転写活性をさせる。このGadd45beta遺伝子発現の機構を調べるために、C/EBPbeta TG miceとKO miceを作成し、実験的検討を行った。
C/EBPbeta TG miceは軟骨特異的にdoxycycline (DOX)にて発現調整が可能なDouble Tg (D-Tg)を作成した。D-Tg mice尾軟骨細胞をDOX-offで培養しC/EBPbeta の発現を亢進させるとGadd45betaは遺伝子レベルで発現亢進することがPCRにて確認された。また免疫組織学的検討により蛋白レベルでの発現亢進を確認した。一方、C/EBPbeta KO miceの膝関節軟骨ではC/EBPbetaおよびGadd45betaの陽性細胞数が統計学的に有意に減少していた。
これらの動物を用いて、膝靭帯切断による変形性関節症新規動物モデルの作成を試み、このモデルを用いてC/EBPbetaおよびGadd45betaが治療標的分子となり得るか否かを検討したが、疾患モデルとしての系を確立することは困難であった。その原因として、靭帯切断モデルにおける軟骨の変性が定量化できないこと、C/EBPbetaおよびGadd45betaの蛋白発現が一定でないことが考えられた。
2014年の第29回日本整形外科学会基礎学術集会において、演題名「軟骨細胞におけるC/EBPbetaによるGADD45betaプロモータ領域への直接的な制御の検討」で発表した。現在実験の最終結果をもって、論文投稿中である。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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