2013 Fiscal Year Annual Research Report
ｐ５３コドン７２ＳＮＰによるｐ５３活性化挙動変化の解析
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23501267
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
土生 敏行 京都大学, 放射線生物研究センター, 助教 (70346071)
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| Keywords | p53 / SNP / HPV |
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| Research Abstract |
SNP(single nucleotide polymorphism)は疾患への感受性や外的因子への応答に深く関わっている。SNPと外的要因による細胞影響研究の理解にはその実験系の構築が重要であると考えられる。その代表例として申請研究ではp53 SNPに着目した。ヒトp53 にはヒトだけが持つ72 残基SNP も同様にハピローマウイルス（HPV）起因の子宮頸がん発症と関連し、このSNP がp53 標的遺伝子発現誘導能に深く関わっているとされてきた。本申請研究では２３年度に相同組換えにより人工的にSNP を導入した細胞を確立し、コドン72のアルギニンを持つ大腸がん由来細胞HCT116細胞ヘテロアリルを持つ細胞及びホモ遺伝子座をもつ細胞に成功した。さらにこれらの細胞のDNA損傷に対する評価を行い、24年度に渡って行ってきた。これら細胞では、SNPの相違によりp53の標的因子の発現誘導に大きな差を示し、特に細胞周期制御に関わるp21の発現に大きな違いを観察することができた。一方p53の調節因子HMD2やその他細胞死に関与する遺伝子群ではSNPの相違による発現誘導の差は認められなかった。これはSNPによる細胞表現の決定的な因子としてp21があることになる。
さらに25年度にはHPVに対するp53応答を観察するためにHPV E6を導入したHCT116細胞を樹立し、HPVとp53 コドン72 SNPによる影響を調べるためにE6を恒常的に発現するR72 SNP HCT116細胞とヘテロ遺伝子座でP72 SNPを持つHCT116細胞を取得した。ホモ遺伝子座でP72 SNPを持つHCT116細胞においてはE6を恒常的に発現する細胞の取得は困難で、分裂が進むにつれて生存率が低下し実験系として使用できなかった。しかしヘテロSNPを持つ細胞ではP72 SNPのみが安定で、DNA損傷時のp53機能を保証することができることを明らかにした。これらのことからp53 SNPはHPVに対する防御機構としてP72 SNPが存在していることが大いに考えられた。
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[Journal Article] 3. The moyamoya disease susceptibility variant RNF213 1 R4810K induces genomic instability by mitotic abnormality.2013
Author(s)
Hitomi T*, Habu T*, Kobayashi H, Okuda H, Harada HK, Osafune K, Taura D, Sone M, Asaka I, Ameku T, Watanabe A, Kasahara T, Sudo T, Shiota F, Hashikata H, Takagi Y, Morito D, Miyamoto S, Nakao K, Koizumi A.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun.
Volume: 439:4
Pages: 419-426
DOI
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[Journal Article] 4. Downregulation of Securin by the variant RNF213 R4810K (rs112735431, G>A) reduces angiogenic activity of induced pluripotent stem cell-derived vascular endothelial cells from moyamoya patients.2013
Author(s)
Hitomi T*, Habu T*, Kobayashi H, Okuda H, Harada KH, Osafune K, Taura D, Sone M, Asaka I, Ameku T, Watanabe A, Kasahara T, Sudo T, Shiota F, Hashikata H, Takagi Y, Morito D, Miyamoto S, Nakao K, Koizumi A.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun.
Volume: 438:1
Pages: 13-19
DOI
Peer Reviewed
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