2013 Fiscal Year Annual Research Report
新しい初代癌細胞３次元培養法を用いた低酸素によるＤｏｒｍａｎｃｙ誘導機構の解明
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23501282
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| Research Institution | Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Disaeses |
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Principal Investigator |
奥山 裕照 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), 研究所, 総括研究員 (50432373)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 正宏 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), 研究所, 部長 (10342990)
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| Keywords | 低酸素 / dormancy |
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| Research Abstract |
平成２３年度はcancer tissue-originated spheroid (CTOS)におけるmycの発現解析を行った。CTOSと癌細胞株との遺伝子発現を比較した。ヒト大腸癌のCTOSと２次元培養したがん細胞株との遺伝子発現をmicroarrayで比較検討した。解糖系酵素発現に差が見られた。低酸素培養下でのCTOSにおけるHIFとMYCの発現を検討した。CTOSを低酸素下で培養すると、HIFの発現が見られるものの、MYCの発現は無くなった。
平成２４年度は低酸素・低栄養下でのmyc低下のメカニズムについて検討した。HIF-1,2の関与を検討した。HCT116細胞株を用いてHIF-1とHIF-2のノックダウン細胞株を樹立しmycの発現の変化を検討した。HIF-1,2いずれもMycの発現に影響を及ぼさなかった。Endoplasmic stressの関与を検討した。ER stressのmarkerとして、CHOPとeIF-2が知られているが、CHOPもeIF-2もともに低酸素・低グルコース環境下で著明に上昇していた。
平成２５年度は低酸素・低グルコース環境下でのmyc分解の機序をさらに追求した。Fbw7はMB1のスレオニン58とセリン62が関与する。スレオニン58とセリン62のmutantは低酸素・低グルコース下で分解された。skp2はMB2に結合しmyc分化に関与する。MB2 deletion mutant, C-terminal deletion mutant, MB2+C-terminal deletion mutant, N-terminal deletion mutantを作成したが、いずれも低酸素・低グルコース下で分解された。以上の結果から、myc特異的な分解の機序よりもER stressなどによる分解の可能性が示唆されている。
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