高性能イミュノトキシンを用いた急性骨髄性白血病の標的化治療

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23501309
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 山口 美樹 札幌医科大学, 医学部, 助教 (10530454)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 濱田 洋文 東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (00189614) ; 平井 幸恵 札幌医科大学, 医学部, 助手 (20218754) ; 内田 宏昭 東京薬科大学, 生命科学部, 准教授 (20401250)
• Keywords: AML / 標的治療 / イミュノトキシン / モノクローナル抗体 / DT3C / ADC

Research Abstract

本研究は平成23年から平成25年度までの3年計画で進められてきた。この研究の目的は難治性AMLに対する抗体薬物結合体（ADC）治療薬の開発である。
申請者はモノクローナル抗体と混合するだけで簡便にイミュノトキシンを形成できるリコンビナントタンパク質(DT3C)の作製に成功した。DT3Cはモノクローナル抗体との結合体形成（モノクローナル抗体―DT3C結合体：MoAb-DT3C）が容易であり、MoAb-DT3Cを腫瘍細胞に作用することで細胞内へ移行されタンパク合成阻害により強力な殺細胞効果を示す。このDT3Cを用いた抗体スクリーニングに利用することでADC治療薬に適したモノクローナル抗体を得ることが可能である。申請者は急性骨髄性白血病およびその他の骨髄性白血病細胞株であるTF1, MY, KG1, SKM1, HL60, MEG01などをBalb/cマウスに免疫し抗体ライブラリーを作製、DT3Cを用いた抗体スクリーニングを利用してモノクローナル抗体を樹立した。現在までに157個のモノクローナル抗体が樹立され77抗体の抗原が同定された。同定された標的分子はCD38, CD43, CD44, CD47, CD71, CD81, CD99, CD102, CD147, CD151, CD317, CD321, MHC ClassI, MHC ClassIIの14種類である。これらの抗体は強い殺細胞効果を示しいずれも治療薬の候補抗体といえる。しかしながら、副作用のリスクを考えるとこれら全ての抗体が治療薬候補とはならない。これらの標的分子の中で特に治療薬の候補になる抗体の条件は正常主要臓器(特に腎臓、肝臓、脳、心臓など)における発現が低いことが挙げられる。申請者らはBioGPSなどのデータベースを活用して主要正常臓器での発現が低い標的抗原について検索した。正常主要臓器での発現が低い標的分子はCD38, CD43, CD47, CD71であった。これらについて難治性AMLに対するADC治療薬としての有用性について評価を進めていきたい。

Research Products

• [Presentation] Development of fully retargeted oncolytic herpes simplex virus vectors by insertion of tumor-specific single-chain antibodies into viral envelope glycoprotein D (2013)
  • Author(s): Takuma Suzuki1, Tomoko Shibata1, Yu Okubo1, Takeshi Fukuhara1, Yoshitaka Miyagawa2, Justus B. Cohen2, Joseph C. Glorioso2, Kenji Nakano3, Izumi Kumagai4, Masahide Kuroki5, Miki Yamaguchi6, Sachie Hirai6, Hirofumi Hamada1, and Hiroaki Uchida1
  • Organizer: 第６１回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20131110-20131112
• [Presentation] Application of monoclonal antibody resources to a fully retargeted HSV platform (2013)
  • Author(s): Tomoko Shibata1, Takuma Suzuki1, Yu Okubo1, Mao Komai1, Takeshi Fukuhara1, Miki Yamaguchi2, Sachie Hirai2, Yoshitaka Miyagawa3, Justus B. Cohen3, Joseph C. Glorioso3, Hirofumi Hamada1, and Hiroaki Uchida1
  • Organizer: 第６１回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20131110-20131112
• [Presentation] Generation of immunotoxins with super-targeting mAb in acute myeloid leukemia (2013)
  • Author(s): Miki Yamaguchi1, Yukari Nishii1, Hirofumi Hamada1,2
  • Organizer: 第７５回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 札幌
  • Year and Date: 20131011-20131013
• [Presentation] Generation of Immunotoxins against AML: Cytocidal activities with anti-CD71 mAb (2013)
  • Author(s): Yukari Nishii1, Miki Yamaguchi1, Hirofumi Hamada1,2
  • Organizer: 第７５回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 札幌
  • Year and Date: 20131011-20131013
• [Presentation] Generation of immunotoxins with super-targeting mAb in the leukemia/lymphoma (2013)
  • Author(s): Yukari Nishii1, Miki Yamaguchi1, Hiroaki Uchida2, Hirofumi Hamada1,2
  • Organizer: 第７２回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] Application of in-house monoclonal antibody resources to a fully retargeted oncolytic herpes simplex virus platform (2013)
  • Author(s): Yu Okubo1, Takuma Suzuki1, Tomoko Shibata1, Mao Komai1, Takeshi Fukuhara1, Miki Yamaguchi2, Sachie Hirai2, Yoshitaka Miyagawa3, Justus B. Cohen3, Joseph C. Glorioso3, Hirofumi Hamada1, and Hiroaki Uchida1
  • Organizer: 第７２回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] Establishment of highly functional monoclonal antibodies through novel screening methods for targeted cancer therapy (2013)
  • Author(s): Moegi Sato1, Miki Yamaguchi2, Hitomi Ikeda1, Yuta Matsuura1, Takeshi Fukuhara1, Hirofumi Hamada1, and Hiroaki Uchida1
  • Organizer: 第81回日本生化学会大会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 20130910-20130913