2011 Fiscal Year Research-status Report
ポリシアル酸とＦＧＦ２による神経機能の新しい制御メカニズムの証明
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23570133
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
佐藤 ちひろ 名古屋大学, 生物機能開発利用研究センター, 准教授 (10343211)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | ポリシアル酸 / FGF / 酸性多糖 / ヘパラン硫酸 / BDNF / 細胞増殖 / 増殖因子 / ポリシアル酸転移酵素 |
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| Research Abstract |
ポリシアル酸は脳に局在するユニークな生理活性糖鎖であり、これまでその巨大な排除体積による反接着作用のみが考えられてきた。我々は近年ポリシアル酸が、脳に存在する種々の神経作用因子、脳由来神経栄養因子(BDNF)や神経伝達物質(ドーパミン)と特異的に結合し複合体を形成すること、それらの細胞外濃度を制御することにより細胞内へのシグナル伝達を変化させることを明らかにしてきた。本研究では、特に神経作用因子の中でも増殖因子FGF2に焦点をあて、そのポリシアル酸との複合体の性状を詳細に検証すること、FGF受容体(FGFR)との三者会合体の可能性をさぐること、細胞増殖やそのシグナル伝達に及ぼす影響を明らかにすることが目的である。本年度は特にポリシアル酸とFGF2の相互作用解析の方法を確立することを目的とした。ゲル濾過クロマトグラフィーとゲルシフトアッセイによりポリシアル酸とFGF2との直接的な結合の証明を様々なポリシアル酸構造(結合位、重合度、シアル酸組成)とFGF2を用いて行った。またポリシアル酸とFGF2との解離常数の解析には表面プラズモン共鳴法を用いた。特に特異的な結合に対する解離常数を正確に求めるために、カルボキシメチルデキストランコートされている通常のChipではなく、金表面に自己組織膜を形成させ、その表面上に多糖を固相化するという工夫を行った。加えて非特異的な吸着に関しては(GlcNAc)3のセンサーグラムをバックグラウンドとして用いることで、より正確な解離定数を求めることに成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ポリシアル酸とFGF2の相互作用を直接的に解析する方法を確立し、ポリシアル酸とFGF2の相互作用が定量的に解析できるようになったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、ポリシアル酸のFGF2保持機能をHSとFGF2との関係性と比較する予定であり、計画通りに推進する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度も計画に従って使用する予定である。
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[Presentation] Expression of sialic acids2012
Author(s)
Akiko Fujita,(3人), Chihiro Sato, Ken Kitajima.
Organizer
GCOE International Symposium
Place of Presentation
Sakata & Hirata Hall, Nagoya University, Japan
Year and Date
January 11-12,2012
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[Presentation] Polysialic acid chains display2011
Author(s)
Ono, Isomura, Hane, Sumida, Kitajima, Sato.
Organizer
International Symposium on Glycoconjugates
Place of Presentation
The University of Vienna, Vienna, Austria
Year and Date
August 21-26, 2011
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[Presentation] Extensive incorporation2011
Author(s)
Sadako Inoue, Chihiro Sato, and Ken Kitajima.
Organizer
International Symposium on Glycoconjugates
Place of Presentation
The University of Vienna, Vienna, Austria.
Year and Date
August 21-26, 2011
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