2013 Fiscal Year Annual Research Report
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23570212
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
中川 拓郎 大阪大学, 理学(系)研究科(研究院), 准教授 (20324866)
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| Keywords | セントロメア / DNA複製 / DNA組換え / クロマチン / 染色体分配 |
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| Research Abstract |
セントロメアは染色体の正確な分配に不可欠である。ところが、ヒトを含む多くの場合セントロメアはリピート配列DNAにより構成されている。そのため、染色体再編が起こり易い染色体脆弱部位の１つでもある。われわれはセントロメアに局在するヒストン様蛋白質CENP-SとCENP-Xがセントロメアでの交叉型組換えを抑制することを明らかにしたCENP-SはCENP-SXSXやCENP-TWSXの複合体を形成することが知られている。CENP-Sが複合体として機能するのかを知るために、蛋白質結合ドメインにアミノ置換LRを導入した分裂酵母CENP-S変異株を作成した。この変異により、CENP-Sの蛋白発現量には大きな変化は見られなかったが、複合体形成が低下し、交叉型組換えが増加することが分かった。また、ミニ染色体を用いて染色体再編について調べたところ、LR変異によりセントロメア再編が高頻度で起きることが明らかとなった。これらの結果から、CENP-Sを含む複合体がセントロメア・リピート間の組換えを制御することで染色体再編を抑制すると考えられる。
セントロメアはDNA複製開始装置が密集し、S期の早い時期に複製されることが知られている。しかし、その生理的意義については未だ不明である。そこで、複製因子ORC蛋白質をセントロメア特異的に分解する系を構築した。具体的には、ユビキチン依存的蛋白質分解に働くE3リガーゼTIR1とセントロメア因子との融合タンパクを発現してTIR1をセントロメアに局在化した。そして、ORCにE3リガーゼの標的配列デグロンを融合することで、オーキシン添加時特異的にORC蛋白質が分解するようにした。
英国オックスフォード大学T.C. Humphrey博士との共同研究により、PCNA様チェックポイント複合体9-1-1がDNA二重鎖切断末端のプロセッシングに関与することを示した。
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[Journal Article] The DNA damage checkpoint pathway promotes extensive resection and nucleotide synthesis to facilitate homologous recombination repair and genome stability in fission yeast2014
Author(s)
Blaikley, E. J., Tinline-Purvis, H., Kasparek, T. R., Marguerat, S., Sarkar, S., Hulme, L., Hussey, S., Wee, B. Y., Deegan, R. S., Walker, C. A., Pai, C. C., Bahler, J., Nakagawa, T., and Humphrey, T. C.
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Journal Title
Nucleic Acids Res
Volume: 42
Pages: 5644-5656
DOI
Peer Reviewed
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