2011 Fiscal Year Research-status Report
Project/Area Number |
23570254
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Research Institution | Hyogo University of Teacher Education |
Principal Investigator |
吉岡 秀文 兵庫教育大学, 学校教育研究科(研究院), 教授 (40191548)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
笠原 恵 兵庫教育大学, 学校教育研究科(研究院), 准教授 (20243347)
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Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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Keywords | 日本 |
Research Abstract |
ZWによる性決定様式を採用する鳥類ではW染色体上に卵巣決定因子が存在するか、またはZ染色体上に遺伝子量依存的な精巣決定因子が存在すると考えられている。先行研究により、ニワトリの性染色体上に位置する遺伝子が明らかになってきた。その結果、W染色体にHINTW(histidine triad nucleotide binding protein W-linked)遺伝子が、さらにZ染色体上にはHINTZ (histidine triad nucleotide binding protein Z-linked)、DMRT-1遺伝子が同定された。鳥類は雄がディフォルトでHINT-Zが雄化を決めていて、同時に雌化の因子を抑制している。雌でHINT-Wが発現するとHINTZとヘテ二量体を形成し、その抑制が脱抑制されることで雌化が始まるという関係示す結果を得ている。両者の相同性は高いがHINTZはHIT motifという活性基を持つのに対して HINTWはその活性基を欠いている。HINTZは二量体で働き、HINTWはHINTZに対してドミナントネガティブに働くことが、in vitroで証明されている(Genome Biolog,4, R18, 2003)。活性としてはLys とAMPとの化学結合を水解する活性であるが、この水解活性には一般的な転写因子であるTFIIFと複合体を作るCdk7が必要である。HINTZが二量体になったときにどのような複合体を形成するのかどうかを、生化学的に解析している。 また、Z染色体に存在するMHM(male hypermethylated region)に発現するRNAの発現の時期や染色体上の部位を詳細に調べた。その代表的なRNAをニワトリ胚に強制発現させ、その影響を調べている。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
細胞系譜の実験を行うために HINTW,HINTZ, Ad4BP/SF-1, DMRT1に対する抗体を作成したが、作成した抗体の特異性に問題があったので、組換え蛋白を再度精製し、抗体を再度、作成しているために 時間が余分にかかっていることがひとつある。
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Strategy for Future Research Activity |
HINTW, HINTZより早い時期に発現する遺伝子群が同定されている。その中から候補を発現様式からしぼり、発現ベクターに挿入して、ニワトリ胚に強制発現させ、その影響を、HINTW,cyp19の雌のマーカー遺伝子変化、HINTZ, Sox9の雄のマーカー遺伝子の発現変化と生殖腺の形態変化を調べる。
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Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
in situ hybridization, PCR, DNA sequencingなどの消耗品や 抗体調製を外部委託する際の費用などに使う予定である。
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