新規ＨＰＬＣ－ＥＳＲ装置による食品成分の活性酸素消去活性のオンライン評価

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23580166
• Research Institution: Kyoto Institute of Technology
• Principal Investigator: 田嶋 邦彦 京都工芸繊維大学, 工芸科学研究科, 教授 (50163457)
• Keywords: スーパーオキソドラジカル / 青果物 / 抗酸化物質 / HPLC-ESR装置

Research Abstract

青果物の水溶性成分（Ws）の活性酸素に対する抗酸化活性を評価しようとする研究が注目されている。青果物のWsにはタンパク質、核酸、糖質、脂質、アミノ酸、遷移金属および代謝物が含まれ、それらが個々の2次反応速度定数[ki]と濃度[Aoxi]で活性酸素種(ROS)と並列的に反応する。本研究では、スーパーオキシドラジカルの測定対象とするHPLC-ESR1法によって青果物Wsに含まれる抗酸化活性物質を詳細に検討し、主要な抗酸化活性成分の帰属およびそれらの総活性に対する寄与（比抗酸化活性）の解析法を確立した。
ESRクロマトグラフのピーク面積(Sj)はある溶出成分jのkj値と濃度[Aoxj]の積に相関することから、比抗酸化活性(Fj %)はSjと総面積(Σ Si)の比として算出した(2)。　　Fj = kj [Aoxj]/Σki [Aoxi] ∝Sj /ΣSi (2)
ブロッコリの各溶出成分のFj 値(%)は次のように算出した；HMW(br1, 73 %)、Asc(br2, 5 %)、Tyr(br3, 7 %)、dT(br4, 7 %)、Trp(br6, 3 %)および未知成分p5(br5, 3 %)。さらに、ほうれん草の溶出ピークsp1 (8.5 min)、sp3 (10.6 min)、sp5 (13.4 min)、sp6 (13.4 min)に含まれる主な抗酸化成分(Fj %)は、それぞれHMW(24%)、Asc (12%)、Tyr(6 5%)、G(3%)と帰属した。sp7(33%)およびsp8(20%)はほうれん草に特有の抗酸化成分であり、268および368 nmの長波長領域に吸収極大を有するフラボノイド誘導体の可能性が高い。このように、青果物に含まれるスーパーオキシドラジカル消去活性物質の比活性を数値化する唯一の方法論として、HPLC-ESR法の有用性が支持された。

Research Products

• [Journal Article] Development of Flow-injection Spin-trapping ESR System for Estimation of Second Order Rate Constants for Reactions of a Superoxide Anion Radical and Selected Phenolic Compounds (2014)
  • Author(s): Sakurai, Y., Nakajima, A., Kanaori, K., Tajima, K.
  • Journal Title: Chemistry Letters Volume: No. 4 Pages: 527-529
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ability of Water-Soluble Biosubstances to Eliminate Hydroxyl and Superoxide Radicals Examined by Spin-Trapping ESR Measurements: Two-Dimensional Presentation of Antioxidative Ability (2013)
  • Author(s): Nakajima, A., Masuda, Y., Matsuda, F., Tajima, K., Sameshima, H., Ikenoue, T.
  • Journal Title: Bioscience Biotechnology and Bochemistry, Volume: 77 Pages: 324-331
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Abilities of Antioxidants to Eliminate the Peroxyl Radical Derived from 2,2'-Azobis(2-Amidinopropane) Dihydrochloride (AAPH) (2013)
  • Author(s): Nakajima, A., Masuda, Y., Matsuda, F., Tajima, K., Sameshima, H., Ikenoue, T.
  • Journal Title: Applied Magnetic Resonance, Volume: 44 Pages: 997-1005
  • DOI: 10.1007/s00723-013-0463-9
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Evaluation of the Antioxidant Abilities of Water-Soluble Biosubstances Using the ORAC-ESR Assay in Combination with the Hydroxyl and Superoxide Radical-Eliminating Abilities (2013)
  • Author(s): Nakajima, A., Masuda, Y., Matsuda, F., Tajima, K., Sameshima, H., Ikenoue, T.
  • Journal Title: Applied Magnetic Resonance, Volume: 44 Pages: 1419-1430
  • DOI: 10.1007/s00723-013-0491-5
  • Peer Reviewed
• [Presentation] NMR analysis of xanthine:cytosine mismatch in DNA duplex (2013)
  • Author(s): Imagawa, T., Pack, SP., Kanaori, K., Tajima, K.,
  • Organizer: The 40th International symposium on Nucleic Acids Chemistry 2013
  • Place of Presentation: 名古屋大学
  • Year and Date: 20131111-20131113
• [Presentation] 流通型ESR法による青果物のスーパーオキシドラジカル消去活性の精密解析 (2013)
  • Author(s): 田嶋邦彦、山口智子、田中宏治、櫻井康博、金折賢二、服部 玄
  • Organizer: 第52会電子スピンサイエンス学会
  • Place of Presentation: 大宮ソニックシティ
  • Year and Date: 20131024-20131024
• [Presentation] HPLC-ESR法によるタケノコの水溶性成分に含まれるスーパーオキシドラジカル消去活性物質の探索 (2013)
  • Author(s): 山口智子、田中宏治、櫻井康博、金折賢二、田嶋邦彦
  • Organizer: 第17回ESRフォーラム研究会
  • Place of Presentation: 九州大学
  • Year and Date: 20130719-20130719
• [Presentation] 青果物におけるフリーラジカル消去活性物質の成分評価 (2013)
  • Author(s): 服部 玄、山口智子、田中宏治、櫻井康博、徳田尚美、金折賢二、田嶋邦彦
  • Organizer: 第66回酸化ストレス学会
  • Place of Presentation: 名古屋ウイング愛知
  • Year and Date: 20130614-20130614