サイトカイン遺伝子を用いた魚類の自然免疫応答の測定

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23580257
• Research Institution: University of Miyazaki
• Principal Investigator: 酒井 正博 宮崎大学, 農学部, 教授 (20178536)
• Keywords: サイトカイン / フグ / プロバイオティクス / Multiplex RT-PCR

Research Abstract

これまでに、フグのサイトカイン遺伝子の発現を網羅的に測定出来るMultiplex RT-PCR法を開発し、それを用いてモンゴル産の乳製品から分離したLactobacillus patacasei(strain 06TCa22)株と、L. plantaru (strain 06CC2)株のプロバイオティクス効果を明らかにした。本年度は、L. patacasei(06TCa22)株を、経口投与して、サイトカイン遺伝子の発現を調べることによって、そのプロバイオティクスの効果について検討を行った。
（方法）、L. patacasei(06TCa22)株を、フグに３日間経口投与を行い、その後、腎臓白血球の貪食能とNBT産生能について検討を行った。さらに、Multiplex RT-PCR法を用いて16種類のサイトカイン遺伝子の発現について検討を行った。最後に、病原菌であるVibrio harveyに対する抵抗性の増加の有無についても検討を行った。
（結果）　前炎症性サイトカインであるIL-1b, IL-6, IL-17A/F-3, TNF-a, TNF-N, 抗ウイルス性サイトカインであるタイプ１インターフェロンの上昇が、L. patacasei(06TCa22)株を投与したフグで確認された。腎臓白血球の貪食能とNBT産生能も、これらのサイトカインと同様に有意な差で上昇が見られた。さらに、V. harveyで攻撃したL. patacasei　(06TCa22)株投与フグの腎臓、血液および脾臓で、有意に本菌の減少が確認された。これらの結果から、サイトカイン遺伝子を用いて魚類の自然免疫応答を測定することができると判断された。

Research Products

• [Journal Article] Cytokine mediated immune responses in the Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) administered with heat-killed Lactobacillus paracasei app. paracasei (06TCa22) isolated from the Mongolian dairy product (2013)
  • Author(s): Biswas, G., Korenaga, H., Nagamine, R., Kawahara, S., Takeda, S., Kikuchi, Y., Dashnyam, B., Yoshida, T., Kono, T., Sakai, M.
  • Journal Title: International Immunopharmacology Volume: 17 Pages: 358-365
  • DOI: 10.1016/j.intimp.2013.06.030
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Elevated cytokine responses to Vibrio harveyi in the Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) trested with Lactobacillus paracasei spp. paracasei(06TCa22) isolated from Mongolian dairy product (2013)
  • Author(s): Biswas, G., Korenaga, H., Nagamine, R., Kawahara, S., Takeda, S., Kikuchi, Y., Dashnyam, B., Yoshida, T., Kono, T., Sakai, M.
  • Journal Title: Fish and Shellfish Immunology Volume: 35 Pages: 756-765
  • DOI: 10.1016/j.fsi.2013.06.004
  • Peer Reviewed
• [Presentation] トラフグ単球におけるサイトカイン遺伝子の発現プロファイル (2013)
  • Author(s): 河野智哉、長峰隆介、是永大樹、酒井正博
  • Organizer: 平成２５年度日本水産学会秋季大会
  • Place of Presentation: 津
  • Year and Date: 20130919-20130922
• [Presentation] A brekthrough in identifying neuropeptide using reverse pharmacology from fish (2013)
  • Author(s): korenaga, H., Hamasuna, S., Ida, T., Sakai, M., Nagamine, R., Kono, T.
  • Organizer: Fish and Shellfish Immunology
  • Place of Presentation: Vigo, Spain
  • Year and Date: 20130625-20130628