2013 Fiscal Year Annual Research Report
多点分子認識ＥＳＩラベル化による先天性代謝異常症の新規精密検査法の開発
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23590046
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| Research Institution | Tokyo University of Science |
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Principal Investigator |
東 達也 東京理科大学, 薬学部, 教授 (90272963)
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| Keywords | 先天性代謝異常症 / LC/ESI-MS/MS / ESIラベル化 / 多点分子認識 / Smith-Lemli-Opitz症候群 / LCHAD欠損症 / 潜在的ビタミンD欠乏症 / キラル分離 |
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| Research Abstract |
Smith-Lemli-Opitz症候群 (SLOS) の病態解析を目標にセロトニン (5HT) の多点分子認識ESIラベル化分析法を検討したが，試薬由来の妨害物質が除去できないこと，それに起因してLC/ESI-MS/MSで高感度分析が困難なことが判明した．そこで，5HTの最終代謝産物である5-hydroxyindole acetic acid (5HIAA) のレベルがSLOSで変動するとの仮説を立て，その尿中分析法を開発に切り替えた．すなわち，5HIAA用新規高感度化試薬，1-[(4’-dimethylaminophenyl)carbonyl]piperazine (DAPPZ) をデザイン・開発し，尿分析に適用したところ，共存物質の妨害を受けることなく，5HIAAのピークを明瞭に検出することができた．
先天性代謝異常症診断マーカー分子の中には，3-hydroxypalmitic acid (3-HPA) に代表されるキラル化合物も存在し，精密な診断には対掌体の弁別測定必要な場合が考えられる．このことから，新たにESI活性キラル誘導体化試薬，(S)-1-(4-dimethylaminophenyl-carbonyl)-3-aminopyrrrolidine (DAPAP) を開発し，長鎖3-ヒドロキシアシル-CoA 脱水素酵素 (LCHAD) 欠損症診断のための3-HPA分析法を開発した．
最近，新生児のビタミンD不足がくる病や骨軟化症などの骨疾患のみならず，将来の糖尿病，多発性硬化症，統合失調症などの危険因子となることが報告され，その評価法の確立が切望されている．そこで，新生児濾紙血を用いるビタミンD供給状態評価法 (潜在的ビタミンD欠乏症診断法) を開発した．すなわち，新たに4-(4’-dimethylaminophenyl)-1,2,4-triazoline-3,5-dione (DAPTAD) を多点分子認識ESIラベル化試薬として開発し，超高感度かつ不活性妨害代謝物である3-エピ体と完全分離できる新規定量法を確立した．そして，札幌市生まれの新生児濾紙血に本法を適用し，被検児の半数以上が中程度及び深刻なビタミンD不足 (4.5 ng/mL以下) であることを報告した．
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