2013 Fiscal Year Annual Research Report
炎症性サイトカインによる尿細管薬物トランスポータの機能制御とその役割解明
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23590180
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
奥田 真弘 三重大学, 医学部附属病院, 教授 (70252426)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩本 卓也 三重大学, 医学部附属病院, 准教授 (30447867)
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| Keywords | メトトレキサート / リポ多糖 / ラット / 有機アニオントランスポータ / 腎クリアランス |
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| Research Abstract |
炎症時におけるメトトレキサート（MTX）の腎排泄挙動変動とその要因解明を目的とし、LPS投与ラットをモデルとした検討を行った。Wistar系雄性ラット（9週齢）にLPS（4 mg/kg）を腹腔内投与し、炎症モデルラットを作製した。MTX全身クリアランス（CL）実験では、大腿静脈からMTX（5 mg/kg）を瞬時投与後、大腿動脈から経時的に採血し、血漿中のMTX量を2-コンパートメントモデルで解析した。In vivo 腎CL実験では、MTXを瞬時投与（86 micro_g/kg）及び持続注入（134.2 micro_g/hr）後、採取した血液及び尿検体に加え、実験後に摘出した腎組織を用いた。Western Blot分析は、摘出腎から粗膜画分を調製し有機アニオントランスポータ（rOAT1、rOAT3、rMRP2、rMRP4）の特異抗体を用いて行った。免疫染色は、4%PFAで灌流固定したラット腎臓を用い、Alexa594標識二次抗体を用いて行った。MTXの全身CL実験の結果、LPSラットではMTXの血中濃度－時間曲線下面積（AUC）が約2倍まで上昇、全身CLは約1/2まで減少した。中心コンパートメントからのMTX消失速度は、LPSラット有意に減少したが、分布容積は変化しなかった。MTXの腎CLは、LPSラット顕著に減少し、その主な要因として糸球体ろ過速度および尿細管分泌速度の低下（それぞれ約1/8及び約1/17まで減少）が明らかになった。LPSラットではMTXの腎組織／血漿中濃度比が減少傾向であり、腎組織から管腔への排泄CLは有意に減少した。腎粗膜画分におけるrOAT1、rOAT3、rMRP2、rMRP4発現量は、LPSラットでそれぞれ53%、70%、49％、85%まで減少した。免疫染色の予備検討では、LPSラットではMRP4の刷子縁膜局在が拡散傾向にあった。
以上から、LPS投与ラットではMTXの腎CLが顕著に減少し、その原因として糸球体ろ過の低下に加え、有機アニオントランスポータの低下の関与が示唆された。
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