2012 Fiscal Year Research-status Report
食道扁平上皮癌における細胞極性制御因子ＰＡＲ－３遺伝子欠失の機能解析
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23590470
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
安居 幸一郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30323695)
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| Keywords | PAR-3 / PARD3 / 食道扁平上皮癌 / 欠失 / 細胞接着 / タイトジャンクション |
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| Research Abstract |
わが国で食道扁平上皮癌の患者は多い。しかもその予後は不良である。治療成績を向上させるためには、食道扁平上皮癌の発生・進展に関与する特異的な分子病態を明らかにし、治療標的分子を同定することが重要である。発癌メカニズムのひとつにDNA コピー数異常がある。食道扁平上皮癌に生じたDNA コピー数異常を高密度オリゴヌクレオチドアレイで網羅的に解析した結果、Partition-defective 3 (PAR-3)遺伝子のホモ欠失と発現消失を初めて発見した。ホモ欠失は癌抑制遺伝子のマーカーのひとつである。PAR-3は細胞間タイトジャンクションと細胞極性の形成に必須の分子であるので、その発現が失われると細胞極性と細胞間接着が消失すると予想される。細胞極性と細胞間接着の消失は進行癌に共通して観察される現象であり、周囲への浸潤や転移に密接に関連する。本研究は、PAR-3の発現消失が食道扁平上皮癌におけるタイトジャンクションの形成異常および浸潤・転移・増殖に関わる機能的役割、さらにその臨床病理学的意義を解明することを目的とする。
本年度は以下のことを明らかにした。PAR-3の発現が保持されている細胞株ではPAR-3とタイトジャンクションのマーカーであるZO-1が細胞間接着面に共局在していた（タイトジャンクションが形成されていた）。一方、PAR-3 遺伝子がホモ欠失し、発現が消失している食道扁平上皮癌細胞株（KYSE30 とKYSE270）ではZO-1が細胞間接着面に局在していなかった（タイトジャンクションが形成されていなかった）。これらKYSE30 とKYSE270細胞にPAR-3 遺伝子を強制発現させると、ZO-1が細胞間接着面に局在するようになった。逆に、PAR-3の発現がある細胞株でPAR-3をノックダウンすると、ZO-1が細胞間接着面から消失した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
PAR-3 遺伝子の強制発現とノックダウンの実験で、PAR-3がZO-1を細胞間接着面へリクルートし、タイトジャンクション形成を促進することを明らかにできた。
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| Strategy for Future Research Activity |
（１）PAR-3遺伝子のホ乳類細胞内発現ベクターとPAR-3遺伝子をノックダウンするshRNA発現ベクターを作製して、PAR-3恒常発現細胞とshRNA恒常発現細胞をそれぞれ樹立する。これらを用いて①タイトジャンクション形成、②細胞の浸潤・転移・増殖、③ヌードマウスでの腫瘍形成・転移、に関するPAR-3の機能を検討する。
（２）食道扁平上皮癌の臨床検体を用いて、PAR-3の欠失と発現低下がどのような臨床病理学的意義を持つのか、調べる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
研究費は、PAR-3遺伝子発現ベクターとshRNA発現ベクターの作製、細胞培養、マウス飼育、PCRやWestern blot、蛍光免疫染色などに必要な試薬・飼料に充てる。また、学会旅費、論文作成費、文具と書籍購入費等にも研究費を使用する予定である。
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Research Products
(15 results)
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[Journal Article] Rosuvastatin ameliorates high-fat and high-cholesterol diet-induced nonalcoholic steatohepatitis in rats2013
Author(s)
Okada Y, Yamaguchi K, Nakajima T, Nishikawa T, Jo M, Mitsumoto Y, Kimura H, Nishimura T, Tochiki N, Yasui K, Mitsuyoshi H, Minami M, Kagawa K, Okanoue T, Itoh Y
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Journal Title
Liver Int
Volume: 33
Pages: 301-311
DOI
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[Journal Article] Clinicopathological features of liver injury in patients with type 2 diabetes mellitus and comparative study of histologically proven nonalcoholic fatty liver diseases with or without type 2 diabetes mellitus2013
Author(s)
Shima T, Uto H, Ueki K, Takamura T, Kohgo Y, Kawata S, Yasui K, Park H, Nakamura N, Nakatou T, Tanaka N, Umemura A, Mizuno M, Tanaka J, Okanoue T
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Journal Title
J Gastroenterol
Volume: 48
Pages: 515-525
DOI
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[Journal Article] FGF3/FGF4 amplification and multiple lung metastases in responders to sorafenib in hepatocellular carcinoma2013
Author(s)
Arao T, Ueshima K, Matsumoto K, Nagai T, Kimura H, Hagiwara S, Sakurai T, Haji S, Kanazawa A, Hidaka H, Iso Y, Kubota K, Shimada M, Utsunomiya T, Hirooka M, Hiasa Y, Toyoki Y, Hakamada K, Yasui K, Kumada T, Toyoda H, Sato S, Hisai H, Kuzuya T, Tsuchiya K, Izumi N, Arii S, Nishio K, Kudo M
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Journal Title
Hepatology
Volume: 57
Pages: 1407-1415
DOI
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[Journal Article] Alterations of the SWI/SNF chromatin remodelling subunit-BRG1 and BRM in hepatocellular carcinoma.2013
Author(s)
Endo M, Yasui K, Zen Y, Gen Y, Zen K, Tsuji K, Dohi O, Mitsuyoshi H, Tanaka S, Taniwaki M, Nakanuma Y, Arii S, Yoshikawa T.
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Journal Title
Liver Int
Volume: 33
Pages: 105-117
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Epigenetic silencing of miR-335 and its host gene MEST in hepatocellular carcinoma.2013
Author(s)
Dohi O, Yasui K, Gen Y, Takada H, Endo M, Tsuji K, Konishi C, Yamada N, Mitsuyoshi H, Yagi N, Naito Y, Tanaka S, Arii S, Yoshikawa T.
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Journal Title
Int J Oncol
Volume: 42
Pages: 411-418
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Prediction of a favorable clinical course in hepatitis C virus carriers with persistently normal serum alanine aminotransferase levels: A long-term follow-up study2013
Author(s)
Nishimura T, Yamaguchi K, Fujii H, Okada Y, Yokomizo C, Niimi T, Sumida Y, Yasui K, Mitsuyoshi H, Minami M, Umemura A, Shima T, Okanoue T, Itoh Y.
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Journal Title
Hepatol Res
Volume: 43
Pages: 557-562
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Clinical and pathological progression of non-alcoholic steatohepatitis to hepatocellular carcinoma2012
Author(s)
Yasui K, Hashimoto E, Tokushige K, Koike K, Shima T, Kanbara Y, Saibara T, Uto H, Takami S, Kawanaka M, Komorizono Y, Okanoue T, and The Japan NASH Study Group.
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Journal Title
Hepatol Res
Volume: 42
Pages: 767-773
DOI
Peer Reviewed
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