2014 Fiscal Year Research-status Report
縦断的継続診療によるアルツハイマー病及び軽度認知機能障害病態バイオマーカーの確立
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23590669
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| Research Institution | Doshisha University |
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Principal Investigator |
松本 明 同志社大学, 研究開発推進機構, 嘱託研究員 (80181759)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武地 一 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (10314197)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2016-03-31
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| Keywords | 軽度認知障害 / 血漿バイオマーカー / 立体構造 / タウペプチド / モノクロナル抗体 / 補体成分 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までの研究解析成果により、軽度認知障害（ＭＣＩ）の状態にある人の血漿バイオマーカー候補として、タウ蛋白の一部のエンドペプチダーゼ消化ペプチドのＣ端側断片立体構造が、最も有力な候補物質として確認された。
本年度はこの候補物質について詳細な構造解析とモノクロナル抗体特異性解析を行った。
前者では受託解析によりコンピュータ上で作成した本候補物質の構造に対する反応性・結合性物質の探索・解析を行った。具体的にはドッキングシュミレーション用ソフトウエアを駆使して、血液中の既知エンドペプチダーゼとの結合性、他物質との結合性を解析し、血液中で当該構造物のどの部分が実際に暴露されており、どの部分が遮蔽されているかを推定した。 後者では上記結果を踏まえ、既に多く作成されている当該物質に対する立体構造認識モノクロナル抗体クローン群について、その認識抗原決定基の解析、ＭＣＩ者血液中での結合物質の有無の検討を行った。
以上解析の結果、（１）候補エンドペプチダーゼが当該立体構造に結合して各抗体との結合性に影響を及ぼしている確率は無視できる程度に低いこと、が明らかになり、更に（２）血液中物質で当該立体構造に結合し、確率的に有意に抗体結合性を修飾する生体成分としてＣ４ｄ（主要な補体成分Ｃ４の断片）が同定された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ＭＣＩの血漿バイオマーカーとして、タウペプチドのうち特定のエンドペプチダーゼ断端（Ｃ端側）の立体構造が、最も有力な候補物質として同定されるまでは比較的順調に進捗した。
しかし、血漿を用いたＭＣＩに対する特異性解析、感度解析はいずれの抗体クローンも実際にそのまま診断手法として応用するには十分ではなく、概要で記した様に候補立体構造のin silico解析など特殊な技術的対応を行わなければ突破口がなく、それには当初予想した以上の時間と研究資源の追加を必要としたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在解析に使用している血漿検体（正常群およびＭＣＩ群）について、今年度の解析で明らかになった修飾要因（特定の補体成分など）について、次年度は検体ごとの解析を行い、既存のモノクロナル抗体の中から感受性・特異性とも最も優れたクローンを解明し、必要によっては修飾した抗原を用いた抗体作製をおこない、バイオマーカーとしての至適化を目指す。
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| Causes of Carryover |
本年度の解析結果から、本研究目的であるＭＣＩの血液バイオマーカーとしての立体構造認識モノクロナル抗体の選択・確立のため、さらに追加解析すべき内容が明らかになったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
（１）血液中物質で当該立体構造に結合し、確率的に有意に抗体結合性を修飾する生体成分としてＣ４ｄが同定されたが、解析対象の全血漿検体（正常例およびＭＣＩ例）について、Ｃ４ｄの発現量を明らかにする。
（２）（１）の解析結果から、補体成分Ｃ４ｄの既存モノクロナル抗体の病態弁別能力（感受性・特異性）に及ぼす影響を解析する。
（３）（２）の結果により、既存抗体からバイオマーカー候補抗体を確立する。
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Research Products
(1 results)
