2012 Fiscal Year Research-status Report
悪性中皮腫におけるＡＴＢＦ１の細胞内動態解析と癌幹細胞マーカー発現の有無
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23590692
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
湊 宏 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10293367)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中田 聡子 金沢医科大学, 医学部, 助教 (30569091)
竹上 勉 金沢医科大学, 総合医学研究所, 教授 (10113490)
三浦 裕 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90285198)
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| Keywords | ATBF1 / 癌抑制遺伝子 / 免疫組織化学 / 細胞内局在 / 悪性中皮腫 / 悪性度 / 癌幹細胞 |
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| Research Abstract |
悪性中皮腫34例と、反応性中皮37例の外科材料に対して、抗ATBF1抗体(D1-120)を用い免疫染色を施行した。染色の評価は、核・細胞質における染色強度をそれぞれ陰性=0～強陽性=3の4段階に分け、陽性細胞の割合(%)と染色強度をかけた値を免疫染色指標とした。反応性中皮での核内染色指標は、160±31 (中央値±四分位偏差)で、悪性中皮腫での核内染色指標は95±60であり、悪性中皮腫では有意に核内の染色性が低下した(p値<0.01)。細胞質の免疫染色指標は反応性中皮で20±10 (中央値±四分位偏差)、悪性中皮腫で123±45であり、悪性中皮腫で有意に増加した(p値<0.001)。核内のATBF1発現は乳癌や胃癌でも低下が報告されており、癌化に伴い核内へのATBF1の移行が阻害されている可能性がある。また、細胞質のATBF1は癌促進因子としての役割を果たしている可能性も否定できず、今後の解析が必要である。
癌幹細胞マーカーに関する解析として、他臓器で報告のあるBmi-1、CD133、ABCG2(BCRP)、Nanog、Nestin、Oct3/4、uPARなどに対する抗体を用いて、それぞれ免疫染色を行った。悪性中皮腫ではBmi-1、CD133、ABCG2(BCRP)、Nanog、Nestinは、それぞれ17/20(85％)、14/20(70％)、10/20(50％)、10/21(48％)、3/20(15％)例に陽性であり、反応性中皮ではそれぞれ、23/23(100％)、2/22(9％)、3/23(13％)、0/23 (0％)、0/23(0％)であった。ABCG2では主に上皮型の悪性中皮腫に陽性であったが、他は組織型との関連は不明であった。Oct3/4、uPARは悪性中皮腫、反応性中皮ともに陰性で、これらの悪性中皮腫における意義は不明であった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
他臓器の癌腫において癌幹細胞マーカー候補として報告されている多数のマーカーの抗体を入手し、至適条件とコントロールを設定した。これらを用いて悪性中皮腫に対する免疫染色を行ったが、いずれも一部の症例にしか陽性とならないか、多くの症例に陽性となるが多数の細胞に陽性となるような結果であった。現在までの結果からは、これらを癌幹細胞マーカーとして扱ってよいかどうかが明確でない。悪性中皮腫における免疫組織化学での癌幹細胞の標識は困難であるのかも知れないし、未知の癌幹細胞マーカーが存在するのかもしれない。現在、これらのマーカーとATBF1との2重染色を試みているところであるが、明瞭な分析ができていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、さらに症例の収集に努め、各種の癌幹細胞マーカーとATBF1の2重免疫染色を成功させ評価したい。癌幹細胞マーカーに関しては、悪性中皮腫培養細胞を用いて蛍光抗体法あるいは免疫染色を行い、組織切片の結果と比較検討を行う。また培養細胞において、癌幹細胞マーカーやATBF1に対するsiRNA投与によりその発現と局在の変化の有無を観察したい。さらに組織切片から悪性中皮腫細胞と良性中皮細胞のマイクロダイセクションを行い、ATBF1mRNAの発現量とATBF1蛋白の細胞内局在との関連性を解析したい。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
該当なし
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Research Products
(1 results)
