ｐ５３経路に関わる機能性ＲＮＡと消化器発がん：バイオマーカーとしての有用性

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23590920
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 佐々木 泰史 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (70322328)
• Keywords: p53 / p63 / p73 / miRNA / 機能性RNA / バイオマーカー / 消化器癌

Research Abstract

本研究では，がん抑制遺伝子p53経路の異常が発がん，がんの進展過程におよぼす分子機構を多面的に理解するため，p53ファミリー (p53, TAp63, TAp73)によって制御される機能性RNAを同定し，その機能解析へと展開する．さらに発現異常，悪性度および化学療法効果との関連性の分析を通じて，消化管癌の新しい診断・治療予測システムを開発しようとするものである．
（１）miR-200ファミリーの新規標的遺伝子CRKLの機能解析
p53誘導性miRNA，miR-200b/200c/429の新規標的遺伝子として同定したCRKL (v-crk sarcoma virus CT10 oncogene homolog-like)について解析をすすめた．CRKL遺伝子の3’-UTRにmiR-200b/200c/429の結合配列を同定し，p53ファミリーがmiR-200b/200c/429を転写活性化し，この配列を介してCRKLの発現を抑制していることを明らかにした．臨床検体の解析から，CRKL遺伝子発現が胃癌組織で上昇し，予後不良と相関することをつきとめた．さらに公共のベータベースを利用した解析により，胃癌だけでなく，乳癌，肺癌，大腸癌においてもCRKL発現上昇が予後不良因子であることを明らかにした．また，p53変異のある症例（大腸癌，乳癌）で有意にCRKLが発現上昇していた．CRKLの導入により，胃癌細胞の増殖，浸潤，遊走能が上昇することを明らかにした．以上の結果から，p53ファミリーがmiR-200b/200c/429の転写誘導を介してCRKLの発現を制御し，がんの浸潤，転移能を抑制していることが示唆された．
（２）p53に制御される新規機能性RNAの同定
マイクロアレイ，およびp53結合コンセンサス配列の全ゲノム網羅的解析より，76のp53誘導性ncRNA候補を同定した．それらすべてについて，RT-PCR法によりp53ファミリーによる発現誘導を確認したところ，6つのncRNAの強い転写誘導が認められた．それらのncRNAについて近傍のp53応答性配列を同定し，p53ファミリーによる転写活性化機構の解析を進めた．

Research Products

• [Journal Article] Forkhead transcription factor FOXF1 is a novel target gene of the p53 family and regulates cancer cell migration and invasiveness (2014)
  • Author(s): Tamura M, Sasaki Y, Koyama R, Takeda K, Idogawa M, Tokino T
  • Journal Title: Oncogene Volume: (in press)
  • DOI: 10.1038/onc.2013.427
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification and analysis of large intergenic non-coding RNAs regulated by p53 family members through a genome-wide analysis of p53-binding sites (2014)
  • Author(s): Idogawa M, Ohashi T, Sasaki Y, Maruyama R, Kashima L, Suzuki H, Tokino T
  • Journal Title: Hum Mol Genet Volume: 23 Pages: 2847-2857
  • DOI: 10.1093/hmg/ddt673
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The effect of IGF-I receptor blockade for human esophageal squamous cell carcinoma and adenocarcinoma (2014)
  • Author(s): Adachi Y, Ohashi H, Imsumran A, Yamamoto H, Matsunaga Y, Taniguchi H, Nosho K, Suzuki H, Sasaki Y, Arimura Y, Carbone DP, Imai K, Shinomura Y
  • Journal Title: Tumour Biol Volume: 35 Pages: 973-985
  • DOI: 10.1007/s13277-013-1131-2
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] AKR1B10, a transcriptional target of p53, is downregulated in colorectal cancers associated with poor prognosis (2013)
  • Author(s): Ohashi T, Idogawa M, Sasaki Y, Suzuki H, Tokino T
  • Journal Title: Mol Cancer Res Volume: 11 Pages: 1554-1563
  • DOI: 10.1158/1541-7786.MCR-13-0330-T
  • Peer Reviewed
• [Presentation] p53 negatively regulates the expression of the nuclear export protein XPO1, establishing a positive feedback loop (2014)
  • Author(s): Sasaki Y, Tamura M, Kobayashi T, Idogawa M, Suzuki H, Shinomura Y, Tokino T
  • Organizer: 41st Congress of the International Society of Oncology and BioMarkers
  • Place of Presentation: Barcelona, Spain
  • Year and Date: 20140315-20140318
• [Presentation] p53 によるXPO1 の抑制機構とその意義 (2013)
  • Author(s): 佐々木泰史，田村みゆき，竹田康佑，井戸川雅史，丸山玲緒，鈴木拓，篠村恭久，時野隆至
  • Organizer: 第72回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] p53によるXPO1の抑制機構とその意義 (2013)
  • Author(s): 佐々木泰史, 小橋健太, 鈴木信太郎, 田村みゆき, 竹田康祐, 井戸川雅史, 篠村恭久, 時野隆至
  • Organizer: 第36回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 2013-12-05
• [Presentation] Forkhead transcription factor FOXF1 is a novel target gene of the p53 family and regulates cancer cell migration and invasiveness (2013)
  • Author(s): Sasaki Y, Tamura M, Koyama R, Takeda K, Idogawa M, Tokino T
  • Organizer: 6th International p63/p73 Workshop
  • Place of Presentation: Kisarazu, Chiba, Japan
  • Year and Date: 2013-07-10