肥満関連液性因子ＡＮＧＰＴＬ２を介した、脂肪肝炎・肝臓癌の病態機序の解明

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23591001
• Research Institution: National Defense Medical College
• Principal Investigator: 冨田 謙吾 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究, 病院, 講師 (50317129)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 関 修司 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究, 医学教育部医学科専門課程, 教授 (80531392)
• Keywords: 非アルコール性脂肪肝炎 / 肝臓線維化 / 肝臓癌

Research Abstract

我々は既に、Angptl2ノックアウトマウスを作成した。これらのノックアウトマウス・wildマウスに、CCL4 4週間投与、DMN 12週間投与、Bile duct ligation施行により各々肝硬変モデルを作成し、肝臓の線維化の程度を、各マウス間で比較検討施行中である。各群の肝臓より、RNA、タンパク質を抽出し、DNA array法、Real time PCR法、Western blot法、免疫沈降法、Gel shift assay法を用い、Akt, MAPK, AMPキナーゼ、PPARalpha, beta, gamma signal、サイトカインを初めとした各種パラメーター及び、転写因子の変化をさらに定量的に評価施行している。さらに、ミトコンドリア抽出により、その膜電位・ATP合成を定量評価している。また、各グループ内で、肝臓RNA・タンパク質、血清タンパク質に関して、DNAマイクロアレイ法およびprotein chip法をおこない、病態形成に有意義と考えられる遺伝子産物のピックアップも施行中である。肝臓癌モデルとして、Diethylnitrosamine　6週間投与、またはコリン欠損食＋ethionine 9ヶ月投与を施行済みである。さらに、近年報告された、高脂肪食摂取とDiethylnitrosamineの組み合わせによる肥満誘導性の肝臓発癌モデル（Park-EJ et al. Cell 2010; 140: 197-208)も施行済みである。これらのモデルに関しては、腫瘍形成における各マウス間の差異を比較検討するとともに、apoptosis、細胞増殖能に関わる各種マーカーの検討中である。
現在得られたデータより、Angptl2の肝臓構成細胞に対する直接作用のレベルで、非アルコール性脂肪肝炎・肝臓線維化・肝臓癌の病態機序に果たすAngptl2の役割が解明されつつある。Angptl2に関わるこれらの知見を、実際の臨床における診断・治療へ応用させるべく、今後の研究を推進させる。

Research Products

• [Journal Article] Free cholesterol accumulation in hepatic stellate cells: mechanism of liver fibrosis aggravation in nonalcoholic steatohepatitis in mice. (2014)
  • Author(s): Tomita K, Teratani T, Suzuki T, Shimizu M, Sato H, Narimatsu K, Okada Y, Kurihara C, Irie R, Yokoyama H, Shimamura K, Usui S, Ebinuma H, Saito H, Watanabe C, Komoto S, Kawaguchi A, Nagao S, Sugiyama K, Hokari R, Kanai T, Miura S, Hibi T
  • Journal Title: Hepatology Volume: 59 Pages: 154-169
  • DOI: 10.1002/hep.26604.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase 1 mediates liver fibrosis by regulating free cholesterol accumulation in hepatic stellate cells. (2014)
  • Author(s): Tomita K, Teratani T, Suzuki T, Shimizu M, Sato H, Narimatsu K, Usui S, Furuhashi H, Kimura A, Nishiyama K, Maejima T, Okada Y, Kurihara C, Shimamura K, Ebinuma H, Saito H, Yokoyama H, Watanabe C, Komoto S, Nagao S, Sugiyama K, Aosasa S, Hatsuse K, Yamamoto J, Hibi T, Miura S, Hokari R, Kanai T.
  • Journal Title: Journal of Hepatology Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2014.03.018.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] C-C motif chemokine receptor 9 positive macrophages activate hepatic stellate cells and promote liver fibrosis in mice. (2013)
  • Author(s): Chu PS, Nakamoto N, Ebinuma H, Usui S, Saeki K, Matsumoto A, Mikami Y, Sugiyama K, Tomita K, Kanai T, Saito H, Hibi T.
  • Journal Title: Hepatology Volume: 58 Pages: 337-350
  • DOI: 10.1002/hep.26351.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] The characteristic Mechanisms of Free Cholesterol Accumulation in Hepatic Stellate Cells Aggravate liver fibrosis in Nonalcoholic Steatohepatitis in Mice (2013)
  • Author(s): Tomita K, Teratani T, Suzuki T, Yokoyama H, Shimamura K, Nishiyama K, Okada Y, Kurihara C, Ebinuma H, Saito H, Hokari R, Sugiyama K, Hatsuse K, Yamamoto J, Kanai T, Hibi T, Miura S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of the European Associatiion for the Study of Liver Diseases
  • Place of Presentation: オランダ アムステルダム
  • Year and Date: 20130424-20130428