2013 Fiscal Year Annual Research Report
マクロファージのＣＯＸ－２を介したＰＰＡＲ活性化機序と動脈硬化抑制効果の解析
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23591337
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
吉永 佳代 (竹田 佳代) 愛媛大学, 医学部附属病院, 助教 (10537088)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
荒木 栄一 熊本大学, 大学院生命科学研究部, 教授 (10253733)
松村 剛 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (20398192)
石井 規夫 熊本大学, 医学部附属病院, 医員 (10599111)
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| Keywords | 脂質代謝異常 |
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| Research Abstract |
1)マクロファージ特異的COX-2-Tg-apoE-KOマウスの作成（in vivo）
ヒトSR-Aプロモーターをその上流に持つ発現ベクターを用い、そのプロモーター部位の下流にヒトCOX-2遺伝子を組み込んだ発現ベクター（pSR-A-COX-2）を構築したうえで、マクロファージ特異的COX-2-Tgマウスの作成を申請者の所属する大学の専門施設（熊本大学 生命資源研究・支援センター 動物資源開発研究部門）に依頼した。得られたキメラマウスの尾部より回収したDNAを鋳型とし、ヒトSR-AプロモーターとヒトCOX-2遺伝子に相同するプライマーを数種作成、これらプライマーを用いて導入遺伝子の存在をPCRで確認したところ、全てのラインで目的とするbase pairの複製DNAを確認できたが、negative controlに用いたC57/bl6マウスのDNAからも同様の複製DNAが得られたため、プライマーペアの数を増やし、再度確認を行った。しかし20種以上の組み合わせを施行したが、やはりnegative controlでのDNA複製が全てのプライマーペアで確認されたため、マクロファージ特異的COX-2-Tg-apoE-KOマウスの作成が確認できていない。鋳型となるDNAのコンタミネーションではないことは確認できたが、特異性の確認ができていないことから、現在得られた複製DNAのシークエンスを行い、複製DNAの特異性を確認中である。またPCRでの確認作業を断念し、サザンブロットでの確認を行うための、特異的プローブの作成中である。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] Apocynin suppresses the progression of atherosclerosis in apoE-deficient mice by inactivation of macrophages.2013
Author(s)
Kinoshita H, Matsumura T, Ishii N, Fukuda K, Senokuchi T, Motoshima H, Kondo T, Taketa K, Kawasaki S, Hanatani S, Takeya M, Nishikawa T, Araki E.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun
Volume: 431
Pages: 124-130
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Association between circulating leukocyte subtype counts and carotid intima-media thickness in Japanese subjects with type 2 diabetes.2013
Author(s)
Matsumura T, Taketa K, Motoshima H, Senokuchi T, Ishii N, Kinoshita H, Fukuda K, Yamada S, Kukidome D, Kondo T, Hisada A, Katoh T, Shimoda S, Nishikawa T, Araki E.
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Journal Title
Cardiovasc Diabetol
Volume: 12
Pages: 177
DOI
Peer Reviewed
