2014 Fiscal Year Annual Research Report
急性前骨髄性白血病キメラ遺伝子ＢＣＯＲ－ＲＡＲＡによる白血病発症機序の解明
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23591410
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
山本 幸也 藤田保健衛生大学, 医学部, 講師 (90410703)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2015-03-31
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| Keywords | 急性骨髄性白血病 / 遺伝子異常 / BCOR |
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| Outline of Annual Research Achievements |
当院での臨床検体を用いて急性骨髄性白血病と骨髄異型性症候群におけるBCOR遺伝子変異をサンガー法を用いてBCORエクソン全長の遺伝子シークエンスを試みた。しかし、サンガー法におけるバックグラウンドノイズの存在が頻度の低い変異を検出するのに不都合であった。そこで次世代シークエンサーを使用してAmplicon sequenceを行う事により、より高感度に遺伝子変異を検出できる方法を試みた。BCOR遺伝子領域はゲノム上で約26000bpsあるが、これを５つの領域 (483 – 4495bps) に分割し, 高正確性PCR酵素であるKODを用いて増幅した。またコントロールとしてTP53遺伝子領域を2912と455bpsに分割して同時に増幅した。これらを混合してライブラリー化し、Illumina Nextera XTキットを用いてDNA断片化とindex付加を行った。シークエンスはMiSeq Reagent Micro Kit v2 (1.2Gb /24 sample)を用いて行った。データ解析はCLC bio Cancer Research Workbenchを用いて行った。50例の解析では平均カバレッジは1000前後であり低頻度の異常を十分に検出可能と考えられた。結果：TP53: G266fs*79, R280S, I255N, V143M, H178fs*3, C238Fが19.1%から82.9%の範囲で検出された。BCOR: Asp284Glu, Ser830fs, Gln1074*, Ala1121Gly, Asn1353Aspが5.1%から46.5%の範囲で検出された。現在、１００例まで検体数を増やして解析を進めている。
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[Journal Article] The fate of patients with acute myeloid leukemia not undergoing induction chemotherapy.2015
Author(s)
Masamitsu Yanada, Akinao Okamoto, Yoko Inaguma, Masutaka Tokuda, Satoko Morishima, Tadaharu Kanie, Yukiya Yamamoto, Shuichi Mizuta, Yoshiki Akatsuka, Masataka Okamoto, Nobuhiko Emi.
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Journal Title
International journal of hematology.
Volume: Published online
Pages: not available
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] A varicella outbreak in B-cell lymphoma patients receiving rituximab-containing chemotherapy2014
Author(s)
Akinao Okamoto, Akihiro Abe, Masataka Okamoto, Tsukane Kobayashi, Yoko Inaguma, Masutaka Tokuda, Masamitsu Yanada, Satoko Morishima, Tadaharu Kanie, Yukiya Yamamoto, Motohiro Tsuzuki, Shuichi Mizuta, Yoshiki Akatsuka, Hiroshi Yatsuya, Tetsushi Yoshikawa, Nobuhiko Emi.
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Journal Title
J Infect Chemother.
Volume: 20
Pages: 774-7
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Construction and molecular characterization of a T-cell receptor-like antibody and CAR-T cells specific for minor histocompatibility antigen HA-1H.2014
Author(s)
Inaguma Y, Akahori Y, Murayama Y, Shiraishi K, Tsuzuki-Iba S, Endoh A, Tsujikawa J, Demachi-Okamura A, Hiramatsu K, Saji H, Yamamoto Y, Yamamoto N, Nishimura Y, Takahashi T, Kuzushima K, Emi N, Akatsuka Y
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Journal Title
Gene Therapy
Volume: 21
Pages: 575-84
DOI
Peer Reviewed
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