ＨＬＡ－ＤＰ分子特異的免疫応答の解析：新しい免疫療法開発に向けて

2011 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23591415
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 村田 誠 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (40378063)
• Project Period (FY): 2011-04-28 – 2014-03-31
• Keywords: 造血幹細胞移植 / HLA / GVHD / GVL効果 / Tリンパ球

Research Abstract

我が国で実施されている同種造血幹細胞移植の約7割は非血縁ドナーから行われている。原則としてHLA-A,B,DR座の計6つのHLAが一致したドナーを選択するが、他のHLA座、特にDPが不一致となる確率は高い。HLA-DP不一致ドナーからの移植は一致ドナーからのそれと比べて、白血病再発率が有意に低下し、一方grade 3以上の重症急性GVHD発症率は上昇しない。このことから、造血幹細胞移植ドナー由来のTリンパ球や抗体は、不適合DPを発現している残存患者白血病細胞を攻撃し、患者上皮細胞は攻撃しないもしくは弱く攻撃する、との仮説を立てることができる。ところが、HLA-DPタンパクが白血病細胞でも発現しているか否かについて詳細に検討した報告はほとんどない。そこで我々はまず、当施設の白血病患者から、文書による説明を行い同意を得た上で白血病細胞の提供を受け、それらの細胞表面上のHLA-DP発現の有無を検討した。AML、ALL、ATLLの腫瘍細胞について、初診時、再発時、更には移植後再発時など様々な時点でのDP発現をFCMで評価したところ、いずれの白血病細胞表面においてもDPの明らかな発現を確認することができた。次に、AML、ALLの腫瘍細胞のうち、CD34陽性CD38陰性分画のみに着目して同様に評価したところ、それら白血病幹細胞を含む分画においてもDP発現を明確に認めた。一方、患者から採取した皮膚組織由来の線維芽細胞では、サイトカイン（IFN等）で刺激しない限り、DPの発現は認めなかった。以上のことから、患者DP特異的Tリンパ球はGVL効果を誘導し、GVHDは誘導しないもしくは弱く誘導する可能性があると考え、今後、ヒト体内で発生した不適合DPに対するTリンパ球反応と抗体反応の実態を解明し、移植後GVL効果とGVHDにおけるその意義を明らかにするべく本研究を進める。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

初年度は血液腫瘍細胞におけるHLA-DPの発現を詳細に検討することができた。患者からの検体集積にやや時間を要したが、仮説通りの結果が得られており、おおむね順調に進展していると思われる。今後さらに研究を加速させたい。

Strategy for Future Research Activity

DP不適合移植を受けた患者の末梢血や骨髄に含まれる患者DP特異的なドナー由来Tリンパ球の存在を、ELISA法やELISPOT法を用いて定量的かつ経時的に測定し、移植後再発やGVHDの発症および重症度との相関を明らかにする。また移植後患者末梢血および骨髄から患者DP特異的Tリンパ球を分離し、移植前保存患者血液細胞と白血病細胞、および樹立した皮膚線維芽細胞に対する細胞傷害活性を、Cr放出試験などの方法を用いて測定し、その結果と移植後再発やGVHD発症・重症度との相関を明らかにする。可能ならば、分離したDP特異的Tリンパ球のクローニングも開始したい。一方、DP不適合移植後患者の血清中に含まれる患者DP特異的抗体についても、定量的かつ経時的に測定し、移植後再発やGVHDの発症および重症度との相関を明らかにしたい。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

細胞培養キット、試薬、実験器具等を購入する。備品購入の予定はない。また本研究の遂行に重要と思われる調査・研究旅費を支出する。平成23年度から平成24年度への繰越金が生じた理由について。当初、外国旅費を平成23年度内に使用する予定であったが、その出張日程が2つの年度に跨がる期間となったことから（平成24年3月31日出発、平成24年4月6日帰国）、決済を平成24年度内に行うことになり、その旅費分を繰り越す必要が生じたことが主な理由である。従って繰越金の多くは、この外国旅費に充当する。その他に、平成24年度に購入する細胞培養液、試薬等の費用が、当初の見込みより多額となることが予想されたたため、平成23年度研究費の一部を平成24年度へ繰り越したことも理由の一つである。

Research Products

• [Journal Article] Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 haplotype correlates with relapse and survival after allogeneic hematopoietic SCT. (2011)
  • Author(s): Murase M, Nishida T, Onizuka M, Inamoto Y, Sugimoto K, Imahashi N, Murata M, Miyamura K, Kodera Y, Inoko H, Naoe T.
  • Journal Title: Bone Marrow Transplantation Volume: 46(11) Pages: 1444-1449
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A prospective dose-finding trial using a modified continual reassessment method for optimization of fludarabine plus melphalan conditioning for marrow transplantation from unrelated donors in patients with hematopoietic malignancies. (2011)
  • Author(s): Terakura S, Atsuta Y, Sawa M, Ohashi H, Kato T, Nishiwaki S, Imahashi N, Yasuda T, Murata M, Miyamura K, Suzuki R, Naoe T, Ito T, Morishita Y.
  • Journal Title: Annals of Oncology Volume: 22(8) Pages: 1865-1875
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Feasibility of reduced-intensity cord blood transplantation as salvage therapy for graft failure: results of a nationwide survey of 80 adult patients. (2011)
  • Author(s): Waki F, Masuoka K, Murata M, et al.
  • Journal Title: Biology of Blood and Marrow Transplantation Volume: 17(6) Pages: 841-851
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Virus-associated hemophagocytic syndrome caused by pandemic swine-origin influenza A (H1N1) in a patient after unrelated bone marrow transplantation. (2011)
  • Author(s): Katsumi A, Nishida T, Murata M, Terakura S, Shimada K, Saito S, Kobayashi M, Kodaira A, Shibata S, Oda I, Yagi T, Kiyoi H, Matsushita T, Kojima T, Naoe T.
  • Journal Title: Journal of Clinical and Experimental Hematopathology Volume: 51(1) Pages: 63-65
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dexamethasone palmitate successfully attenuates hemophagocytic syndrome after allogeneic stem cell transplantation: macrophage-targeted steroid therapy. (2011)
  • Author(s): Nishiwaki S, Nakayama T, Murata M, et al.
  • Journal Title: International Journal of Hematology Volume: - Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Presentation] The effect of sex mismatch on outcome in allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2012)
  • Author(s): Oshima K, Taniguchi S, Fukuda T, Kakihana K, Eto T, Ikegame K, Morishima Y, Nagamura T, Sakamaki H, Atsuta Y, Murata M.
  • Organizer: 2012 BMT Tandem Meetings
  • Place of Presentation: Manchester Grand Hyatt San Diego (San Diego, USA)
  • Year and Date: 2012年2月4日
• [Presentation] 同種造血幹細胞移植患者に対する精神科リエゾン活動の導入 (2012)
  • Author(s): 功刀愛子、川口 綾、鈴木絢子、高木麻里、有友裕子、仙波晴美、小林律子、宮内倫也、杉山由佳、佐藤直弘、西田徹也、木村宏之、村田 誠
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月25日
• [Presentation] ステロイド治療抵抗性急性GVHDに対してヒト間葉系幹細胞が著効した2例 (2012)
  • Author(s): 西田徹也、村田 誠、入山智沙子、後藤絵美、勝見 章、冨田彰裕、直江知樹
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] パルミチン酸デキサメタゾンは、マクロファージの増加した難治性GVHDを改善する：マクロファージを標的とした試み (2012)
  • Author(s): 西脇聡史、中山享之、村田 誠、西田徹也、齊藤繁樹、瀬戸愛花、小澤幸泰、宮村耕一、伊藤雅文、豊國伸哉、永尾圭介、直江知樹
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] HLA不一致骨髄移植後患者におけるHLA特異的CTLからの白血病エスケープ (2012)
  • Author(s): 加藤智則、村田 誠、寺倉精太郎、杉本恭子、西田徹也、直江知樹
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] TRUMPデータに基づく同種造血幹細胞移植後の閉塞性細気管支炎の症例対照研究 (2012)
  • Author(s): 仲宗根秀樹、諫田淳也、吾郷浩厚、福田隆浩、中根孝彦、小林 武、谷口修一、森島泰雄、長村登紀子、坂巻 壽、熱田由子、村田 誠
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] Grade II以上の急性GVHDに対する治療成績：TRUMPデータを用いた解析 (2012)
  • Author(s): 村田 誠、仲宗根秀樹、諫田淳也、中根孝彦、古川達雄、福田隆浩、谷口修一、森 毅彦、衛藤徹也、森島泰雄、長村登紀子、矢部普正、熱田由子、鈴木律朗、坂巻 壽
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] 同種造血幹細胞移植後合併症と長期予後に与えるHCV陽性の影響 (2012)
  • Author(s): 仲宗根秀樹、薬師神公和、黒澤彩子、小川啓恭、大橋一輝、衛藤徹也、坂巻 壽、森島泰雄、長村登紀子、鈴木律朗、村田 誠、谷口修一、福田隆浩
  • Organizer: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪市）
  • Year and Date: 2012年2月24日
• [Presentation] 同種造血幹細胞移植後難治性CMV感染患者におけるCMV抗原特異的T細胞機能低下のメカニズム (2011)
  • Author(s): 加藤智則、西田徹也、村田 誠、直江知樹
  • Organizer: 第3回造血器腫瘍免疫療法研究会学術集会
  • Place of Presentation: ホテル白菊（別府市）
  • Year and Date: 2011年8月21日
• [Presentation] HLA不一致骨髄移植後患者におけるHLA特異的CTLからの白血病エスケープ (2011)
  • Author(s): 加藤智則、村田 誠、寺倉精太郎、杉本恭子、西田徹也、直江知樹
  • Organizer: 第3回造血器腫瘍免疫療法研究会学術集会
  • Place of Presentation: ホテル白菊（別府市）
  • Year and Date: 2011年8月20日
• [Presentation] Correlation of Serum IL-6 Level with Exhaustion of Cytomegalovirus-specific T Cells After Hematopoietic Stem Cell Transplantation. (2011)
  • Author(s): Kato T, Nishida T, Murase M, Ito Y, Murata M, Naoe T.
  • Organizer: The 53rd Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • Place of Presentation: San Diego Convention Center (San Diego, USA)
  • Year and Date: 2011年12月12日
• [Presentation] Leukemia Escape From HLA-Specific T Lymphocyte Pressure in a Recipient of HLA One Locus-Mismatched Bone Marrow Transplantation. (2011)
  • Author(s): Kato T, Murata M, Terakura S, Sugimoto K, Murase M, Nishida T, Naoe T.
  • Organizer: The 53rd Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • Place of Presentation: San Diego Convention Center (San Diego, USA)
  • Year and Date: 2011年12月11日
• [Presentation] Mesenchymal Stem Cells As a Treatment for Steroid-Resistant Acute Graft Versus Host Disease (aGVHD); A Multicenter Phase I/II Study. (2011)
  • Author(s): Ozawa Y, Goto T, Ohashi K, Murata M, Eto T, Kobayashi N, Taniguchi S, Imamura M, Ando K, Kato K, Mori T, Teshima T, Mori M, Muroi K, Miyamura K, Ozawa K.
  • Organizer: The 53rd Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • Place of Presentation: San Diego Convention Center (San Diego, USA)
  • Year and Date: 2011年12月11日
• [Presentation] Efficacy and Safety of human adipose tissue-derived MSCs for supporting hematopoiesis. (2011)
  • Author(s): Nakayama T, Nishiwaki S, Saito S, Ozaki T, Takahashi Y, Maruyama S, Nishida T, Murata M, Kojima S, Naoe T.
  • Organizer: 第73回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • Year and Date: 2011年10月16日
• [Presentation] Exhaustion of cytomegalovirus specific T cells after allogeneic stem cell transplantation. (2011)
  • Author(s): Kato T, Nishida T, Ito Y, Takahashi Y, Murata M, Kojima S, Naoe T.
  • Organizer: 第73回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • Year and Date: 2011年10月15日
• [Presentation] 移植患者生涯手帳作成の試み (2011)
  • Author(s): 宮村耕一、後藤辰徳、小野寺晃一、横畠絵美、小山大輔、渡邊慶介、瀬戸愛花、小澤幸泰、松本公一、加藤剛二、熱田由子、河野彰夫、村田 誠
  • Organizer: 第73回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • Year and Date: 2011年10月15日
• [Remarks]
  • URL: http://www.med.nagoya-u.ac.jp/medical/1639/1674/ketsuekishuyounaikagaku.html