自己抗原をプロテオミクスで同定しＲＡの診断、病態解明、治療に展開する横断的研究

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23591439
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 川上 純 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (90325639)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大山 要 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (50437860) ; 山崎 聡士 広島大学, 大学病院, 助教 (30367388) ; 玉井 慎美 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 講師 (60380862) ; 折口 智樹 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (90295105) ; 有馬 和彦 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 講師 (30423635) ; 阿比留 教生 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (00380981)
• Keywords: RA / 滑膜細胞 / TSP-1 / TGF-β1 / VEGF / サイトカイン／増殖因子 / 疾患活動性 / パワードプラ

Research Abstract

私たちはイムノコンプレキソーム解析法を用いて、関節リウマチ（RA）（晩期RAおよび治療ナイーブの早期RA）の血清中にはTSP-1およびPF-4を含有する免疫複合体が検出され、特にTSP-1を含有する免疫複合体の陽性率は早期RAでも50%以上と高率であることを見出した。それをもとに、RA滑膜炎におけるTSP-1の意義を解析した。組織学的にRA滑膜組織では、TSP-1の強い発現が免疫染色で確認された（変形性関節症を対照として、WinROOFソフトウェアを用いた定量的な解析）。サイトカイン/増殖因子を加えて滑膜線維芽細胞（FLS）を培養し、培養上清のTSP-1をELISAで検討すると、TGF-beta1が最も強くTSP-1産生を誘導し、この作用は転写レベルでも確認された。TNF-alpha、IL-1beta、IL-6、IFN-gammaにはTSP-1の産生増強作用は認めなかった。TSP-1のFLSに対する作用をVEGFやIL-6の産生（サスペンションアレイを含む）やスクラッチアッセイでの遊走能で評価したが、今回の検討範囲では、TSP-1のFLSに対する有意な作用は認めなかった。
RAの治療経過による検討では、臨床的疾患活動性、関節超音波での疾患活動性（パワードプラおよびグレースケール指数）、血清/血漿のTSP-1、TGF-beta1およびVEGFの計時的な解析で評価した。抗リウマチ治療が奏功した症例ではこれが有意に低下するも、疾患活動性の低下を認めなかった症例では、TSP-1を含むバイオマーカーの低下は認められない傾向にあった（この点は現在解析を継続中）。以上の結果より、RA滑膜組織の炎症性ニッチで産生されるTGF-beta1が滑膜細胞に作用し、TSP-1の発現増強が誘導され、これが免疫系を感作し、抗TSP-1抗体が産生されると考えられた。TSP-1のFLSに対する作用については、手法を変えて、解析を継続する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Synovial inflammation assessed by ultrasonography correlates with MRI-proven osteitis in patients with rheumatoid arthritis. (2014)
  • Author(s): Kawashiri SY, Suzuki T, Nakashima Y, Horai Y, Okada A, Nishino A, Iwamoto N, Ichinose K, Arima K, Tamai M, Nakamura H, Origuchi T, Uetani M, Aoyagi K, Eguchi K, Kawakami A.
  • Journal Title: Rheumatology (Oxford). Volume: - Pages: in press
  • DOI: 10.1093/rheumatology/keu034
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ultrasonographic examination of rheumatoid arthritis patients who are free of physical synovitis: power Doppler subclinical synovitis is associated with bone erosion. (2014)
  • Author(s): Kawashiri SY, Suzuki T, Nakashima Y, Horai Y, Okada A, Iwamoto N, Ichinose K, Tamai M, Arima K, Nakamura H, Origuchi T, Uetani M, Aoyagi K, Eguchi K, Kawakami A.
  • Journal Title: Rheumatology (Oxford). Volume: 53 Pages: 562-569
  • DOI: 10.1093/rheumatology/ket405
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Serum amyloid A (SAA) induces pentraxin 3 (PTX3) production in rheumatoid synoviocytes. (2013)
  • Author(s): Satomura K, Torigoshi T, Koga T, Maeda Y, Izumi Y, Jiuchi Y, Miyashita T, Yamasaki S, Kawakami A, Aiba Y, Nakamura M, Komori A, Sato J, Ishibashi H, Motokawa S, Migita K.
  • Journal Title: Mod Rheumatol. Volume: 23 Pages: 28-35
  • DOI: 10.1007/s10165-012-0630-0
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 関節リウマチ患者における抗リウマチ薬治療による関節超音波パワードプラスコアと血管新生因子血清濃度の改善 (2013)
  • Author(s): 川尻 真也, 鈴木 貴久, 中島 好一, 寶來 吉朗, 岩本 直樹, 一瀬 邦弘, 中村 英樹, 川上 純, 玉井 慎美, 折口 智樹, 有馬 和彦, 青柳 潔
  • Journal Title: 九州リウマチ Volume: 33 Pages: 74-80
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 血清学的因子、炎症・バイオマーカーによる早期診断の可能性 (2013)
  • Author(s): 岩本 直樹, 川上 純
  • Journal Title: Progress in Medicine Volume: 33 Pages: 1905-1908
• [Presentation] 関節リウマチ（ＲＡ）患者におけるメトトレキサート（ＭＴＸ）投与による関節超音波画像の検討 (2013)
  • Author(s): 鈴木貴久, 川尻真也, 西野文子, 高谷亜由子, 中島好一, 寳來吉朗, 岡田覚丈, 岩本直樹, 一瀬邦弘, 玉井慎美, 有馬和彦, 中村英樹, 折口智樹, 江口勝美, 川上 純．
  • Organizer: 第28回日本臨床リウマチ学会
  • Place of Presentation: 幕張メッセ（千葉市）
  • Year and Date: 20131130-20131201
• [Presentation] イムノコンプレキソーム解析による自己抗原プロファイリングに基づく自己免疫疾患へのアプローチ (2013)
  • Author(s): 馬場雅子，大山 要、一瀬邦弘、玉井慎美、岸川直哉、川上 純、黒田直敬．
  • Organizer: 第7回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
  • Place of Presentation: 東北大学片平キャンパス（仙台市）
  • Year and Date: 20131123-20131124
• [Presentation] Immune complexome analysis for identifying immune complex antigens. (2013)
  • Author(s): Baba M, Ohyama K, Tamai M, Kishikawa N, Kawakami A, Kuroda N.
  • Organizer: 12th HUPO World Congress
  • Place of Presentation: Pacifico Yokohama（Yokohama）
  • Year and Date: 20130914-20130918
• [Presentation] 関節リウマチ滑膜組織におけるThrombospondin-1(TSP-1)の重要性と調節機能の検討． (2013)
  • Author(s): 鈴木貴久, 山崎聡士, 中島好一, 寳來吉朗, 岡田覚丈, 川尻真也, 岩本直樹，一瀬邦弘, 玉井慎美, 有馬和彦，中村英樹，折口智樹, 尾崎 誠，大山 要, 黒田直敬, 植木幸孝，江口勝美, 川上 純．
  • Organizer: 第34回日本炎症・再生医学会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館（京都市）
  • Year and Date: 20130702-20130703
• [Presentation] HE SEVERITY OF SYNOVIAL INFLAMMATION ASSESSED BY MUSCULOSKELETAL ULTRASONOGRAPHY CORRELATES WITH THAT OF OSTEITIS ASSESSED BY MAGNETIC RESONANCE IMAGING IN PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS. (2013)
  • Author(s): Kawashiri S, Suzuki T, Nakashima Y, Horai Y, Okada A, Iwamoto N, Ichinose K, Arima K, Nakamura H, Origuchi T, Uetani M, Aoyagi K, Eguchi K, Kawakami A.
  • Organizer: Annual European Congress of Rheumatology 2013
  • Place of Presentation: Feria de Madrid (Madrid,spain)
  • Year and Date: 20130612-20130615
• [Presentation] 関節リウマチ（ＲＡ）患者の滑膜におけるtransforming growth factor β1(TGF-β1）によるthrombospondin-1(TSP-1)産生機構の検討：ＴＳＰ-1を含む血清免疫複合体がなぜＲＡ患者で認められるのか (2013)
  • Author(s): 鈴木貴久, 山崎聡士, 中島好一, 寳來吉朗, 岡田覚丈, 川尻真也, 岩本直樹, 一瀬邦弘, 玉井慎美, 有馬和彦, 中村英樹, 折口智樹, 植木幸孝, 川上 純．
  • Organizer: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館（京都市）
  • Year and Date: 20130418-20130420
• [Presentation] 脂肪分化誘導による滑膜細胞からのマトリックスメタロプロテアーゼ産生抑制 (2013)
  • Author(s): 山崎聡士, 岡田覚丈, 遠藤功二, 大岩 寛, 野島崇樹, 熊谷和彦, 川上 純, 杉山 英
  • Organizer: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館（京都市）
  • Year and Date: 20130418-20130420