2013 Fiscal Year Annual Research Report
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23591619
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
高田 実 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 非常勤研究員 (20154784)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 修 岡山大学, 大学病院, 講師 (90294462)
大塚 正樹 岡山大学, 大学病院, 助教 (80452572)
鈴木 規弘 岡山大学, 大学病院, 医員 (10600281)
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| Keywords | melanoma / circulating tumor DNA / circulating tumor cells / gene mutation / oncogene / melanoma stem cells |
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| Research Abstract |
今年度はメラノーマ患者の血漿に漏出する腫瘍由来のDNA断片（circulating tumor DNA, ctDNA）の癌遺伝子変異の検出を試みた。癌遺伝子変異の検出には特異的１塩基伸長反応と飛行時間型質量分析計（MALDI-TOF MS）を組み合わせたMassARRAY分析システムと皮膚がん変異解析パネルMelaCartaを用いてメラノーマの癌遺伝子変異スクリーニングを試みた。このシステムはパラフィン包埋組織から抽出した微量のDNAからBRAF, NRAS, KIT, AKT3など20種類の既知のメラノーマの癌遺伝子の72種類の点突然変異を変異アレル比率５％までの高感度で迅速に検出できる。はじめに血漿ctDNAの対照として、腫瘍組織の癌遺伝子変異をMassARRAYシステムMelaCartaを用いて解析した。これまでに8例の解析を行い、BRAF V600E変異を5例に、NRAS Q61R変異, EPHB6 G404S変異をそれぞれ1例に検出した。本システムは効率、感度ともに優れた変異のスクリーニング法であることを確認した。次いで、メラノーマ患者の血漿からQIAmp circulating nucleic acid kitを用いて微量のctDNAを分離抽出した。これまでに9例の血漿ctDNAの抽出を終え、現在、MassARRAY システムによる解析を施行中である。
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