蛍光ＨＩＶの表皮侵入機構の可視化と新規ＨＩＶ侵入阻害薬の開発

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23591641
• Research Institution: University of Yamanashi
• Principal Investigator: 川村 龍吉 山梨大学, 医学部附属病院, 講師 (70262657)
• Keywords: マイクロビサイド / 性行為HIV感染

Research Abstract

目的）ex vivo 経皮膚HIV感染モデルを用いて、表皮内ランゲルハンス細胞のHIV感染に対して、新たな抗ウイルス薬EFdAが感染予防効果を持つかを検討することにある。
方法）健常ボランティアから皮膚（表皮）を表皮水疱蓋として採取する。あらかじめEFdA、TenofovirおよびMVCなどの抗ウイルス薬を角質側を下にした表皮シートをのせる。30分後に各々の表皮にHIVを曝露する。２時間後表皮シートを洗浄し、培養液に浮かべる。HIV曝露3日後に表皮シートから遊走した細胞をPE標識抗langerin抗体およびAPC標識抗CD11c抗体(LCマーカー)で染色後、FITC標識抗HIVp24抗体で細胞内染色し、フローサイトメトリーにてLCのHIV感染率を解析する。
結果）EFdA、TenofovirおよびMVCの各薬剤の前処置は、100-5000 ng/mlのそれぞれの濃度において、表皮内LCのHIV感染を有意に抑制した。驚くべきことに、EFdAによるLCのHIV感染抑制効果はいずれの濃度においても最も強く、ほぼ100%の抑制効果が得られた。またEFdA、TenofovirおよびMVCの各薬剤（1000 ng/ml）の前処置は、HIV感染LCからCD4陽性T細胞へのウイルス播種を有意に抑制した。EFdAによるHIV感染LCからのウイルス播種抑制効果は最も強く、ほぼ100%の抑制効果が得られた。
意義）今回の研究結果は、新規抗HIV薬EFdAがLCのex vivo HIV感染抑制実験において、Tenofovirに比べて格段に優れた感染抑制効果を持つことが示唆され、EFdAをマイクロビサイドとして使用することによって、性行為HIV 感染をより確実に予防できる可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

EFdAは、マイクロビサイドとして、Tenofovirよりも格段に優れた性行為HIV感染予防効果が期待できる結果が得られた。この臨床的意義は大きく、マイクロビサイドとしてはEFdAが現時点で最も強力に性行為HIV感染を予防できる薬剤：マイクロビサイドであると考えられる。

Strategy for Future Research Activity

薬剤曝露とHIV曝露の間隔をあけることによって、EFdAとTenofovirの阻害効果の持続時間を比較検討し、EFdAが性行為HIV感染における新たなHIV侵入予防薬（マイクロビサイド）として臨床応用可能であるかを検討する予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

次年度の研究費は、HIVBaLの購入や培養液などすべて消耗品の購入に使用する予定である。
また未使用金（23,197円）は、ランゲルハンス細胞同定に必要な抗langerin抗体の購入にあてる予定である。